牙龈卟啉单胞菌蛋白酶基因rgpA与rgpB催化结构域的克隆和表达

发布时间：2020-05-28 20:45

【摘要】： 目的:克隆牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)rgpA、rgpB催化结构域,构建rgpA、rgpB催化结构域原核表达系统。 方法:采用聚合酶链式反应(PCR)从Pg ATCC 33277菌株中扩增rgpA、rgpB催化结构域,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET42a的rgpA/rgpB催化结构域表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导其表达。 结果:所克隆的Pg ATCC 33277菌株rgpA、rgpB基因催化结构域的核苷酸序列与报道的相应核苷酸序列同源性分别为98.9%、99.0%,氨基酸序列同源性分别高达99.2%、99.1%。pET42a-rgpA/rgp B-BL21DE3系统的蛋白表达量为细菌总蛋白的60%左右。 结论:本研究成功地构建了Pg rgpA、rgpB催化结构域高效表达系统,为测定RgpA、RgpB免疫原性及作用提供前提。
【图文】：

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【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R780.2

【参考文献】

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本文编号：2685810