变异链球菌luxS基因在铁代谢和氧化应激中的功能研究

发布时间：2020-06-03 23:22

【摘要】：目的探讨luxS基因在变异链球菌铁代谢方面的功能；比较标准株和luxS基因突变株在过氧化氢培养基中不同时间的生存率差异,以及铁螯合剂对生存率的影响,探讨luxS基因在变异链球菌氧化应激中的作用及机制。方法利用变异链球菌标准株以及前期实验室构建成功的luxS基因突变株,通过测定两菌株在不同浓度铁限制条件培养基中24h的吸光度值(A值),以及luxS基因突变株在加入外源性铁或者标准株上清液的铁限制条件培养基中培养24h的A值,比较两菌株的生长差异；变异链球菌标准株和luxS基因突变株培养至对数中期分成三组,一组作为对照组在普通乳酪消化胨酵母(TPY)培养液中生长,另两组作为实验组,其中一组加入过氧化氢终浓度58.8mmol/L的TPY培养液中,另一组加入含有铁螯合剂2,2’-联吡啶的过氧化氢终浓度为58.8mmol/L的TPY培养液中。分别在厌氧培养的0.5、1、2h取菌液采用平板活菌计数法测定活菌数,计算生存率,统计学分析。结果培养24h,两种菌株在铁螯合剂浓度为0.1mmol/L的培养基中均未表现明显生长抑制(P0.05),在螯合剂浓度增大至0.3mmol/L时,突变株表现出生长抑制(P0.05),在螯合剂浓度至0.5mmol/L时,生长抑制更为显著(P0.001)。在铁限制培养基中生长抑制的luxS基因突变株转移至新鲜培养基、外源性铁或标准株上清液加入的同浓度铁限制培养基中培养24h,突变株的生长均能达到较高细胞密度(P0.05)。和对照组相比,实验组中luxS基因突变株的生存率在所测定的时间点均高于标准株(p0.05)；与不含铁螯合剂的实验组相比,铁螯合剂的加入并未提高菌株的过氧化氢耐受力(p0.05) 结论luxS基因在变异链球菌生长中具有铁代谢作用；luxS基因参与变异链球菌氧化应激耐受的调节,该氧化应激耐受并不是通过避免芬顿反应(Fenton reaction)毒性作用实现的。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R781.1

【参考文献】