Smurf1对Smad信号通路的调节在舌癌发生中的作用

发布时间：2020-06-04 15:15

【摘要】：肿瘤的发生发展是多因素影响的多步骤复杂过程,由多种基因参与,主要表现为肿瘤细胞凋亡受阻、分化障碍、增殖失控。在生理情况下,细胞的增殖、分化、成熟及凋亡受到多种正负调控因子的严格调控,正、负调节信号处于动态平衡中,维持着生理状态的稳定。肿瘤发生机制之一可能是细胞对负反馈的抑制物的反应性发生了改变从而使细胞脱离了正常的生长调控。BMP信号传导通路的异常与许多肿瘤的发生、发展密切相关,BMP、Smads、靶基因的质和量的改变都和人类许多肿瘤发生密切相关。泛素-蛋白酶体降解系统广泛存在于各种真核细胞中,参与调控细胞多种生理进程。作为该系统中行使调控降解功能的核心成员,E3泛素连接酶的重要作用已经越来越引起人们的重视。E3泛素连接酶Smurf1作为这一系统的重要组成部分,参与调控组织中BMP通路中分子信号转导过程。本研究采用脂质体转染技术使舌癌细胞中Smurf1蛋白产生高表达,使用Western blot技术以研究其在舌癌中对Smad1和Smad5蛋白含量的影响,使用MTT法检测其对舌癌细胞的影响,为舌癌的治疗寻求有效的基因治疗方法。 目的 研究舌癌细胞中Smurf1过表达对Smad1及Smad5蛋白表达的影响,并且观察Smurfl蛋白过表达对舌癌细胞增值活性的影响。 方法 利用脂质体转染技术将含有Smurf1基因的质粒转染进舌癌ca127细胞中,利用Western blot技术检测Smurf1蛋白、smad1蛋白、smad5蛋白含量的变化,利用MTT技术检测转染后舌癌细胞增殖活力的变化,并作统计学分析。 结果 1.含Smurf1基因质粒成功转染进舌癌细胞ca127中。Smurf1基因载体质粒中含有绿色荧光蛋白基因,转染后从荧光显微镜中观察到含绿色荧光蛋白的舌癌细胞,说明质粒已成功转染进入舌癌细胞。 2.转染后舌癌细胞中Smurf1蛋白表达量与对照组相比明显升高,Smad1蛋白含量与对照组相比明显降低,Smad5蛋白含量与对照组相比明显降低。 3.MTT法检测转染后舌癌细胞,发现其增殖活力与对照组相比明显增高。 结论 1Western Blot检测到转染后Smurf1蛋白含量与对照组相比明显升高,而Smad1蛋白及Smad5蛋白含量明显降低,这说明过表达的Smurf1对Smad1和Smad5蛋白的表达产生了抑制作用。 2.MTT检测显示高表达的Smurf1蛋白增强了舌癌细胞的增殖活力。 3.高表达的Smurf1蛋白对舌癌细胞的影响机理与其对Smad1蛋白及Smad5蛋白的抑制作用有关。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.86

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 严晓华;章隽宇;陈晔光;;抑制性Smad蛋白对TGF-β超家族信号转导的调控及其生理意义[J];细胞生物学杂志;2009年02期

2 张文岚,孙文伟,卜丽莎,李广生;Smad蛋白家族与骨形态发生蛋白信号传导[J];中国地方病学杂志;2002年04期

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本文编号：2696573