肠道柔嫩梭菌与牙周健康相关性研究

发布时间：2020-06-05 09:12

【摘要】：背景：牙周炎是一种常见的口腔慢性感染性疾病,其发生发展受多种因素的影响。流行病学研究表明,全球约有超过三分之二的人患有不同形式的牙周疾病,而患有中度和重度牙周炎的成人患者分别约为44%～57%和10%。虽然牙周致病菌是牙周炎发生的始动因子,但其疾病进程最终由宿主的免疫反应决定。而调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)作为机体主要的免疫抑制和调节细胞,在牙周炎的发生发展中发挥着不可替代的作用。 2型糖尿病是常见的内分泌代谢性疾病,被认为是牙周病的危险因素之一。临床对照研究结果表明,在局部刺激因素相似的情况下,2型糖尿病患者的牙周炎发生率及严重程度均大于无糖尿病者。目前大量研究认为,2型糖尿病是一种与机体免疫功能紊乱有关的低度慢性炎症。随着全球生活方式的改变和老龄化进程的加速,牙周炎和2型糖尿病的患病率正在呈快速上升趋势,且二者相互影响已成为世界范围内的公共健康问题。因此,探讨防治该类炎症性疾病的新方法具有重要的科学意义和深远的社会意义。近来,有研究发现肠道菌群柔嫩梭菌(Clostridium leptum subgroup,C. leptum)能促进Treg细胞的产生,并通过增殖和活化Treg细胞及分泌一些相关抗炎细胞因子(如IL-10)来抑制自身损伤性炎症反应,从而减轻对机体的免疫病理损伤。最近的研究发现,给予成年小鼠口服C. leptum可有效诱导Treg细胞的增殖和活化,并显著减轻OVA致敏小鼠气道内炎性细胞浸润及炎性细胞因子的分泌。上述研究结果提示C. leptum可能参与了某些炎性疾病的发展过程并在一定程度上减轻机体的炎症反应,这将对常见的口腔慢性炎性疾病牙周炎的科学研究和临床治疗产生重要的指导意义。虽然C. leptum在炎性疾病中的作用愈来愈受到国内外专家及学者的关注,但是目前有关该菌群与牙周组织健康状况之间的研究尚未见报道。C. leptum是否与牙周组织局部炎症状态有关,是否能发挥其抗炎特性减轻牙周组织的炎症破坏至今尚不清楚。目的：应用Real-time PCR方法对粪便中C. leptum进行定量检测,初步探讨肠道C. leptum与牙周组织炎症状态之间的关系,为牙周炎的临床治疗提供新的思路。方法：选取慢性(中重度)牙周炎患者(CP组)、2型糖尿病患者(DM组)、伴2型糖尿病的慢性(中重度)牙周炎患者[(DM+CP)组]及健康对照者(HC组)各20例为研究对象,每位受试者均进行问卷调查和牙周临床检查,并收集粪便标本。根据C. leptum16S rRNA序列设计特异性引物,以常规PCR产物经克隆后的质粒DNA为标准品,经梯度稀释后制备标准曲线。待测粪便标本提取细菌基因组DNA,应用SYBR Green I实时荧光定量PCR方法对标本中的C. leptum进行定量分析。采用SPSS17.0软件对所得结果进行统计学分析。计量资料用均数±标准差(x±s)表示,各组间临床指标PD、AL和基因拷贝数的比较采用成组设计资料的t检验,BOP阳性率比较采用卡方检验,P＜0.05则认为差异有统计学意义。结果： 1.各组PD、AL和BOP阳性率比较：(DM+CP)组的PD和AL值均显著大于HC组、CP组和DM组(P＜0.05);(DM+CP)组的BOP阳性率明显高于HC组、CP组和DM组(P＜0.05)。 2.各组标本每克湿便中C. leptum的16S rRNA基因拷贝数的对数值(10gcopies/g)分别为：HC组(7.09±0.17),CP组(6.31±0.58),DM组(5.79±0.52),(DM+CP)组(5.41±0.29)。CP组、DM组及(DM+CP)组C. leptum基因拷贝数明显低于HC组(P＜0.01)。(DM+CP)组C. leptum基因拷贝数明显低于CP组和DM组,差异有统计学意义(P＜0.01)。结论：肠道菌群C. leptum的数目与牙周组织局部炎症状态之间有一定的关系。与HC组、CP组和DM组相比,C. leptum数目最少的(DM+CP)组患者其牙周组织破坏最严重,提示在某种程度上低水平的C. leptum可能不足以抑制过度的自身损伤性免疫应答,从而导致牙周组织的局部炎症破坏加重。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R781.4

【参考文献】