DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和鳞癌组织中的表达及其相关性

发布时间：2020-06-08 05:15

【摘要】： 目的:检测DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和口腔鳞癌组织中的表达情况,探讨DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑癌变过程中变化及可能机制,且进一步了解DPC4与P16及Bcl-2的关系,为口腔癌前损害癌变的检测、口腔鳞癌的早期诊断、治疗选择及预后等方面提供参考指标。方法:取口腔白斑26例,口腔鳞癌30例和正常口腔粘膜组织10例。以4%的多聚甲醛固定,石蜡包埋,制成2μm切片,行免疫组织化学(polymer法和SABC法)检测DPC4、P16及Bcl-2蛋白的表达变化,其中每组各10例中取部分组织立即存于液氮或-80℃超低温冰箱用于提取RNA,进一步做荧光实时定量PCR检测组织中DPC4 mRNA的表达。结果: 1.DPC4蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织白斑组织鳞癌组织(P㩳0.05)。每组各10例中的DPC4 mRNA的表达水平亦有统计学差异,正常口腔粘膜组织白斑组织鳞癌组织(P㩳0.05)。SABC法和荧光定量PCR对DPC4检测结果一致性较好(Kappa=0.9320.75)。 2.Bcl-2蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织㩳白斑组织㩳鳞癌组织(P㩳0.05)。 3.P16蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义,正常口腔粘膜组织白斑组织鳞癌组织(P㩳0.05)。 4.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关(r = -0.827,P0.05);DPC4蛋白表达与P16蛋白表达呈正相关(r = 0.569,P0.05)。结论: 1.DPC4蛋白和DPC4 mRNA的表达强度从正常口腔粘膜组、口腔白斑组到鳞癌组逐渐减弱,提示DPC4基因的缺失可能与口腔粘膜癌变有关。P16蛋白在口腔鳞癌组中的表达少于正常口腔粘膜组及白斑组,提示P16基因表达下降可能参与了口腔鳞癌的发生发展过程。Bcl-2蛋白的表达随着癌变程度增加而增加,表明Bcl-2蛋白的高表达有利于口腔粘膜癌变的发生。 2.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关,而与P16蛋白表达呈正相关,提示了DPC4基因的缺失表达、P16基因的低表达和Bcl-2基因的过表达三者可能单独或共同参与了口腔白斑癌变过程,可作为口腔白斑癌变检测的指标。 3.免疫组化法与荧光定量PCR法具有一致性,由于免疫组化对实验设备要求不高,费用相对较低,可以通过这种方法对目的基因的蛋白表达进行初步检测。
【图文】：

内参,倍数,口腔白斑,表达水平

说明目标基因和内标基因的扩增效率相同，就可以通过△△CT 方法进行相对定量。在统计图1 中，直线斜率是 0.037，因而假设成立，△△CT 方法可以用来分析数据。1.2 通过实时荧光定量 PCR 法对 10 例正常口腔粘膜、10 例口腔白斑和 10 例口腔鳞状细胞癌中的 DPC4 mRNA 检测，结果显示口腔白斑组织中 DPC4mRNA 表达水平比正常口腔粘膜组织中 DPC4 的 mRNA 表达水平明显降低，有统计学意义（P<0.05），，而比口腔鳞癌组织中 DPC4 的 mRNA 表达水平明显升高（P<0.05）见统计图表 2

口腔白斑,表达水平,口腔鳞状细胞癌,统计图表

说明目标基因和内标基因的扩增效率相同，就可以通过△△CT 方法进行相对定量。在统计图1 中，直线斜率是 0.037，因而假设成立，△△CT 方法可以用来分析数据。1.2 通过实时荧光定量 PCR 法对 10 例正常口腔粘膜、10 例口腔白斑和 10 例口腔鳞状细胞癌中的 DPC4 mRNA 检测，结果显示口腔白斑组织中 DPC4mRNA 表达水平比正常口腔粘膜组织中 DPC4 的 mRNA 表达水平明显降低，有统计学意义（P<0.05），而比口腔鳞癌组织中 DPC4 的 mRNA 表达水平明显升高（P<0.05）见统计图表 2
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R739.8

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