白细胞介素-1基因多态性、中间普氏菌与慢性牙周炎、冠心病相关性研究

发布时间：2020-06-08 06:03

【摘要】：目的：探讨白细胞介素-1A+4845 (interleukin-1A+4845, IL-1 A+4845)、白细胞介素-1B-31 (interleukin-1B-31, IL-1B-31)基因型与慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)、冠心病(coronary heart disease, CHD)易感性的关系,分析易感基因的携带与冠状动脉粥样硬化斑块中牙周可疑致病菌中间普氏菌的检出之间的相关性。采用先进的定量技术检测龈下菌斑及冠状动脉粥样硬化斑块中中间普氏菌。方法：收集中重度慢性牙周炎患者127例,冠心病患者123例,慢性牙周炎合并冠心病患者87例和健康对照117例的颊黏膜拭子,提取DNA,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)对IL-1A+4845/Fnu 4H1、IL-1B-31/Alu I位点的基因型进行检测,比较各基因型在4组间检出率的差别；收集慢性牙周炎合并冠心病患者38例龈下菌斑及冠状动脉粥样硬化斑块,采用Chelex-100法提取DNA,以聚合酶链反应法(polymerase chain reaction, PCR)检测中间普氏菌,并观察其与白细胞介素-1B-31 (IL-1B-31)等位基因T的携带之间的关系；运用实时荧光定量PCR技术比较中间普氏菌在龈下菌斑及冠状动脉粥样硬化斑块的量。结果：1)IL-1 A+4845基因型在4组间基因型的差异无统计学意义；2)IL-1B-31等位基因T在中重度慢性牙周炎组中的检出率显著高于健康对照组,而在冠心病组与健康组、慢性牙周炎合并冠心病组与健康组间的检出率差别无统计学意义。3)Pi在38例患者冠状动脉粥样硬化斑块中的检出率为42.1%,在龈下菌斑中的检出率为68.4%,在同一患者冠状动脉粥样硬化斑块及龈下菌斑中同时检出中间普氏菌9例,一致率为29.0%。4)等位基因T的携带在龈上菌斑检出Pi组有较龈上菌斑未检出Pi组高,且差异有统计学意义。5)本研究设计的实时荧光定量PCR法的引物具有良好的特异性和敏感性。结论：IL-1B-31等位基因T可能是中重度慢性牙周炎的一个遗传学标志；在冠状动脉粥样硬化斑块中中间普氏菌DNA的检出,提示牙周炎相关致病菌在冠心病的发生、发展中可能起重要作用；IL-1B-31等位基因T可能与龈下菌斑中中间普氏菌检出之间存在相关性。
【图文】：

电泳图,电泳,PCR扩增产物,位点

扩增产物、酶切产物电泳结果及儿一1基因型测序结本提取DNA后经PCR检测，扩增出}_1{}{J)}一段自加丫!一纯冠心病病人】23，女性46例，年龄36一76岁，、卜均(58.6士10.7)岁;「{，、币度，馒127例，，男卞卜76例，女性51例，年龄31一74岁，平均(57.4士8.5)少补慢性才周炎患者87例，男书}52例，女性35例，年龄40一71岁7.5)岁。另选另选健康志愿者117例作对照，其‘!‘男性68例，_女性一69岁，“卜均(56.8士8.3)岁。各组在性别平}l年龄夕}!_}红!_)戊均衡(l)。IB一31位点PCR扩增，!_!的条粥:电泳结果如下，一可见条带清楚，无杂，「1的条带大小与预期结果一致。加入限制性内切酶Alu137OC水凝胶电泳，结果如下TT华因型不被切J「，只有长度为239bp的一个因型产生一几个片段，长度依次239bp，137bp和loZbp;cc锥因型，长度分别是137bp和loZbp。测序验证结果，[iJ一见到c一T的突变方法及结果真实可靠。(结果见图1至图3)

纯合子,测序,慢性牙周炎,冠心病

2白细胞介素一1(IL一l)基因型分布2·1IL一IA+4845基因型分布各组均以纯合子GG基因型的检出率最高，本次实验未检出纯合子CC基因型。4组间基因型的分布差异无统计学意义(才一2.246，尸>0.05)。有21.37%(97/454)的受试者携带IL一IA+4845等位基因C，结果见表5。表5IL一IA+4845/Fnu4HI基因型分布(O/O)分组GGGC单纯慢性牙周炎并冠心病冠心病单纯慢性牙周炎健康对照74.7180.4976.3882.0525.2919.51O023.6217.95产，J工了7J斤2Zr00，阔，冲|2.2IL一IB一31基因型分布
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R781.4

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