人唇腺中趋化性细胞因子CCL28的表达研究

发布时间：2020-06-10 16:39

【摘要】： 趋化性细胞因子是细胞因子中的一种,该家族是一个小分子(8-16kDa)蛋白质的超家族,在氨基酸序列上存在20-70%的同源性。根据半胱氨酸的位置、排列方式及数量的不同,其被分为四类:CXC类(α)趋化性细胞因子、CC类(β)趋化性细胞因子、C类(γ)趋化性细胞因子、CXXXC类(6)趋化性细胞因子。 CCL28是2000年发现的一种新的趋化性细胞因子,它属于上述分类中的CC类,曾被称为粘膜相关上皮趋化性细胞因子(MEC)。其可介导循环中的IgA抗体分泌细胞跨过血管壁向局部实体组织内迁徙。口腔中的SIgA是口腔免疫防御机制中至关重要的因素之一,主要来自大、小涎腺,其中来自小涎腺的约占30-35%。Pan等人应用斑点杂交分析证明人体的多种组织中均表达CCL28,其中以结肠、气管、大涎腺、乳腺表达较丰富。人大涎腺表达的CCL28,一方面可介导IgA~+ ASC由血循环向涎腺实体组织中迁徙,另一方面还可随唾液分泌到口腔中发挥杀菌抑菌作用。国内李潇的研究表明,在唾液中IgA的水平与CCL28的含量具有相关性。然而,迄今为止对人小涎腺中CCL28的表达和分泌情况尚无研究报道。因此,本课题的目的在于以唇腺组织为研究对象,从不同角度证实小涎腺中表达CCL28,从而为探讨小涎腺在维持口腔IgA水平方面的作用奠定基础。方法: 1)应用实时荧光相对定量PCR技术来证实人的唇腺组织中表达CCL28 mRNA。 2)应用寡核苷酸探针原位杂交来检测唇腺组织中CCL28 mRNA的表达部位。 3)应用免疫组织化学来检测唇腺组织中CCL28蛋白的表达和分布情况。结果: 1)实时荧光相对定量PCR结果表明健康成人的唇腺组织中表达丰富的CCL28mRNA。经统计学分析,其表达量(170.67±77.44)显著高于大肠对照组(19.50±14.55)(P＜0.001)。其后的唇腺和腮腺CCL28表达比较表明,前者中的表达量(1.28±0.57)显著高于后者(0.79±0.24)(P＜0.01)。 2)原位杂交显示CCL28 mRNA存在于腺泡上皮细胞胞浆中。 3)免疫组织化学显示唇腺腺泡上皮细胞胞浆、腺管上皮细胞、泡内粘液中均存在CCL28蛋白。但其染色深浅存在差异,这表明这几处CCL28蛋白的浓度不同。结论: 同大涎腺一样,健康成人的唇腺中也表达丰富的CCL28,且其表达量高于腮腺。CCL28 mRNA表达于腺泡上皮细胞胞浆中,其翻译得到的蛋白质一部分在唇腺中发挥趋化作用,以吸引IgA~+ ASC,从而使其分泌IgA;而另一部分则随唾液分泌到口腔中发挥抗菌抑菌作用。这为进一步探讨小涎腺在维持口腔SIgA水平中的作用奠定了基础。
【图文】：

电泳图,电泳图,唇腺,标本

PCR产物电泳图

曲线,唇腺,曲线,扩增片段

432IM1000bT50bP500bP250bP100bP图1PCR产物电泳图。M:DNAM肚kerDL2000。1:唇腺标本A中的CCL28扩增片段。2:唇腺标本A中的p一actin扩增片段。3:唇腺标本B中的CCL28扩增片段。4:唇腺标本B中的p一actin扩增片段。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R78

【参考文献】