不同环境下癌干细胞相关标志在舌癌细胞中的表达

发布时间：2020-06-22 23:51

【摘要】： 目的:在内、外不同环境下,观察各种癌干细胞相关标志在舌癌细胞中的表达,明晰微环境对癌干细胞的影响,为进一步明确舌癌干细胞标志提供前期实验依据。 方法:①体外环境设立与检测:体外培养条件为标准培养条件下(RPM1640+10%胎牛血清)和“悬浮球”培养条件下,在两种环境下培养舌癌细胞系(TCA8113),并采用流式细胞术,免疫化学染色法检测各种癌干细胞相关标志(CD44、ESA、CXCR4、Nestin、Pan-CK)的表达。②体内环境设立与检测:建立TCA8113舌癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型、淋巴道转移模型和腹水瘤模型,在各模型的移植肿瘤组织中采用流式细胞术,免疫化学染色法检测各种癌干细胞相关标志(CD44、ESA、CXCR4、Nestin、Pan-CK)的表达的表达。此外,还检测已经成功培养的淋巴结转移性癌细胞系(lyTCA)中上述各种癌干细胞相关标志的表达。 结果:免疫细胞化学染色结果显示TCA8113细胞系高表达CD44、ESA、CXCR4,Pan-CK,不表达或者低表达Nestin;流式细胞术结果显示其高表达CD44(98.2±0.49%)、ESA(99.7±0.21%)、CXCR4(35.6±7.07%)。TCA8113细胞置于“悬浮球”培养条件下培养22天后,镜下可见悬浮球形成。流式细胞术结果显示,“悬浮球”细胞高表达CD44(99.9±0.03%)、ESA(98.7±0.19%), CXCR4低表达(2.75±1.67%)。将“悬浮球“置入标准培养基培养后,细胞形态与生长方式与原在标准培养基环境中的舌癌细胞相似,流式细胞术结果显示各标志表达率为:CD44( 99.7±0.26 %)、ESA( 99.0±1.14%)、CXCR4( 36.7±4.63%)。lyTCA细胞系高表达CD4(498.9±0.90% )、ESA( 99.3±0.77%)、CXCR4( 35.1±3.29%)。TCA8113裸鼠皮下移植瘤建模成功,免疫组化结果显示,皮下移植瘤中舌癌细胞高表达CD44、ESA、CXCR4 ,低表达Pan-CK、Nestin;流式细胞术结果显示其高表达CD44(84.3±5.17%)、ESA(94.0±3.22%)、CXCR4(85.6±6.37%)。免疫组化结果显示淋巴结转移模型中转移淋巴结(乆窝)转移性癌高表达CD44、ESA、CXCR4、nestin,低表达pan-CK。TCA8113注射裸鼠腹腔1个月后,大量血性腹水形成,流式细胞术结果显示CD44 ( 95.3±4.59% )、ESA(99.9±0.05%)、CXCR4(79.4±3.93%)均高表达。结论:在不同环境下,CD44和ESA在舌癌细胞中稳定地高表达。CXCR4、Pan-CK和nestin在不同的环境下存在着表达差异。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R739.8
【图文】：

果 舌癌细胞系 TCA8113 中 CD44、ESA、CXCR4、pan-CK、达在舌癌细胞系 TCA8113 中，CD44（图 1）、ESA（图 2）、CXCR4、p 3）均强阳性表达，nestin（图 4）不表达或低表达。

图 2 ESA 在 TCA8113 细胞中的阳性表达（箭头所指，×400）Fig2 The expression of ESA in TCA8113 cells (×400)

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本文编号：2726448