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siRNA干扰MRP1抑制人舌癌细胞耐药性的研究

发布时间:2020-06-30 19:03
【摘要】:目的:利用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制人舌癌耐药细胞多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance associated protein 1, MRP1)的表达,观察其对所培养细胞耐药性的干扰情况。 方法:设计针对MRP1基因的siRNA,转染人舌癌多药耐药细Tca8113/CDDP,镜下观察动态转染情况并确定转染效率。用RT-PCR分析MRP1 mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测MRP1的蛋白表达;MTT法检测MRP1 siRNA对耐药细胞的干扰作用。 结果:Tca8113/CDDP细胞转染MRP1 siRNA后,MRP1 mRNA表达较对照组明显降低,降低率为61.3%;转染36h后MRP1 siRNA组的MRP1蛋白表达阳性率较对照组明显减低;MRP1 siRNA组中顺铂对Tca8113/CDDP细胞生长的抑制作用明显强于其他对照组,且抑制作用随时间的延长而增强。 结论:MRP1 siRNA可以明显抑制口腔癌耐药细胞的多药耐药。
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R739.8
【图文】:

重组体,酶切电泳


图1重组体酶切电泳图EleetroPhoresisdisPlayofthereeombinantenzyme一digestio1:MRPISael,2:MRPISael,3:MRPISaelarker:20O0bP、1000bP、75ObP、SO0bP、25ObP、10ObP)

效果图,转染,荧光,效果图


图2pGenesll一1.1一MRPlsiRNA重组质粒测序峰图Figure2SequencinggraPhofPGenesil一1.1一MRPIsiRNA2MRPIsiRNA转染情况及转染效率MRP1siRNA转染Tcas113/cDDP细胞后,在荧光倒置显微镜下察,可见转染后12、24、36、48h的绿色荧光强度逐渐增强,转染率逐渐提高,转染后36h的转染率达最高,为68.4%。转染后48和36的转染效率无统计学意义(P>O.05)。结果表明:MRPIsiRNA转染Tcas113/CDDp细胞36h后,可达最高转染效率(图1)。故后续实选择转染后36h的细胞以测定其基因和蛋白表达。

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本文编号:2735699


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