烤瓷冠基底金属浸提液对人牙龈成纤维细胞uPA和其抑制剂PAI-Ⅰ表达的影响

发布时间：2020-07-08 00:51

【摘要】：目的金属合金作为口腔的修复材料应具有良好的生物相容性，近年来研究发现，金属离子的腐蚀性可以导致细胞毒性，甚至造成牙周组织的损伤。本实验通过分析四种金属浸提液对人牙龈成纤维细胞（Human gingival fibroblasts, HGFs）尿纤溶酶原激活剂（umkinase-type plasminogen activator，uPA）和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(type-1plasminogen nactivato inhibitor，PAI-Ⅰ）的表达差异，探索烤瓷冠基底合金对人牙龈成纤维细胞生理活性影响的机制,同时为评价口腔修复材料生物相容性提供新方法。方法（1）选用健康人牙颈部的健康牙龈组织（患者知情同意），采用改良组织块法进行原代培养并传代，取第4代细胞进行波形丝蛋白和角蛋白免疫荧光实验，并绘制生长曲线，进行细胞鉴定。（2）HGFs经过镍铬、钴铬、纯钛及金钯合金四种金属浸提液的作用，采用免疫荧光和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测在金属浸提液作用下HGFs中PAI-Ⅰ和uPA的含量变化，分析PAI-Ⅰ和uPA的含量变化与不同金属离子之间的关系。统计学分析采用SPSS13.0软件，进行重复测量资料的方差分析，P＜0.05证明数据有统计学意义。结果（1）细胞经免疫荧光实验分析波形丝蛋白染色为阳性，角蛋白染色为阴性，证明细胞来源于中胚层;绘制细胞生长曲线，同样证实细胞来源于中胚层。（2）PAI-Ⅰ免疫荧光图片在电镜下观察，镍铬组和钴铬组，染色深，分泌均匀，分布于整个细胞；阴性对照组、纯钛组和金钯合金组，细胞染色浅，分泌不均匀，只存在于细胞核附近。（3）ELISA结果表明：uPA在各个时间点的表达在阴性对照组、纯钛组和金钯合金组之间差别无显著意义（P㧐0.05）。在12h和24h镍铬组、钴铬组与阴性对照组之间差异具有显著性意义（P㩳0.05）。各时间点镍铬组和钴铬组，纯钛组和金钯合金组之间差异也无显著性意义。结论某些金属离子可以诱导人牙龈成纤维细胞PAI-Ⅰ和uPA的升高，影响细胞的正常代谢，促进细胞外基质的溶解，造成牙周组织的损伤。其中镍铬合金和钴铬合金浸提液对人牙龈成纤维细胞uPA和PAI-Ⅰ表达影响较明显，纯钛和金钯合金浸提液对其无明显影响。本实验探讨合金腐蚀性对人牙龈成纤维细胞及牙龈组织影响机制之一，uPA和PAI-Ⅰ的表达分析可以作为评价口腔修复材生物相容性的新方法。
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R783

【参考文献】