原花青素对牙本质及粘接界面耐脱矿和再矿化能力影响的实验研究

发布时间：2020-07-24 05:52

【摘要】：尽管随着粘接技术的不断发展和粘接材料的日益更新，树脂牙本质粘接修复体已具有令人满意的即刻粘接性能，然而粘接耐久性的不理想仍然困扰着牙科医生，成为口腔粘接领域亟待解决的重要科学问题。因牙本质脱矿深度与粘接树脂渗透深度不匹配而形成的混合层底部的胶原裸露带正是粘接界面的薄弱区域，是影响粘接耐久性的关键结构因素。目前，基质金属蛋白酶抑制剂、乙醇湿粘接技术、低收缩树脂、抗菌粘接剂等措施的应用虽能在一定程度上增强树脂-牙本质粘接修复体抵抗外源性因素侵袭的能力，但混合层底部的裸露胶原未被封闭，粘接失败的风险依然存在。因而再矿化修复粘接界面薄弱区域被认为是提高粘接修复体寿命的终极措施。体外研究证实，利用仿生矿化技术可实现粘接界面的再矿化，然而矿化周期长，存在胶原尚未被矿化而已被降解的风险。联合多种措施提高粘接耐久性可能是将来解决这一问题的可行方向。近年来，交联剂在脱矿牙本质改性研究中被证实具有增强牙本质基质、提高树脂-牙本质粘接试件耐降解能力的作用。其中，天然交联剂原花青素（proanthocyanidins,PA）以其生物相容性好、反应速率适中、来源广泛、具有多种生物学活性的优点而备受关注。本课题组前期对葡萄籽提取物PA在全酸蚀粘接系统中的应用方式进行了研究，摸索出临床可行的PA粘接预处理方式，并证实以这种方式改性处理酸蚀后的脱矿牙本质可保护树脂-牙本质粘接界面，减缓混合层底部裸露胶原的降解，提高粘接耐久性，具有良好的临床应用前景。然而，混合层胶原纤维裸露的问题依然不可避免。新近研究报道，PA可影响脱矿-再矿化平衡而抑制根面龋进展。受此启发，本研究采用课题组前期PA粘接预处理方式，拟研究葡萄籽提取物PA对牙本质耐脱矿或再矿化能力的影响。由于PA的作用机制主要是稳定胶原，保存矿化支架，目前并不确定它是否具有实质性的促进再矿化作用，因而联合应用经典的再矿化活性物质酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙（casein phosphopetides amorphic calcium phosphate，CPP-ACP），观察单独PA预处理或联合应用对脱矿牙本质再矿化及界面脱矿—再矿化平衡能力的影响，以期为提高界面耐酸碱老化的能力提供参考，扩大PA口腔应用及在提高粘接耐久性方面的潜在临床应用。 1主要研究目的 1.1确定实验样品PA的总酚含量和溶液pH对PA稳定性的影响。 1.2探讨PA是否具有抑制牙本质脱矿的作用，以及溶液浓度、pH不同对PA作用的影响。 1.3研究不同浓度及pH的PA溶液改性处理脱矿牙本质，对其再矿化能力的影响，并进一步观察PA粘接预处理联合应用CPP-ACP对牙本质再矿化的作用。 1.4研究PA溶液粘接预处理脱矿牙本质单独及联合CPP-ACP或PA溶液对粘接界面pH循环下脱矿-再矿化平衡的影响。 2主要研究方法 2.1采用福林酚法测定实验样品PA的总酚含量，并用紫外光谱分析不同pH的PA乙醇溶液和PA水溶液的稳定性。 2.2制备牙本质试件，每日进行PA溶液-酸性脱矿液-中性缓冲液浸泡的pH循环，阴性、阳性对照组分别用去离子蒸馏水、0.1%NaF溶液代替PA溶液处理，6天后应用电感耦合等离子体原子发射光谱仪测定酸性缓冲液中钙离子释出量，测定pH循环脱矿前后表面显微硬度的差值，激光共聚焦显微镜分析牙本质脱矿程度。 2.3将经PA预处理的脱矿牙本质试件置于人工体液中浸泡15天，其中部分样本每日经CPP-ACP或含聚丙烯酸的CPP-ACP再矿化处理，以未经PA预处理和经NaF处理的样本作为对照，测试脱矿后、预处理后、再矿化不同时间后试件表面显微硬度，并采用场发射扫描电镜及X射线衍射仪观察分析表面形貌和沉积物物象。 2.4将经PA粘接预处理的粘接试件进行水存老化和pH循环老化，pH循环时分别用去离子蒸馏水、CPP-ACP和PA溶液处理试件，以未经PA预处理的试件作为对照，测试各组粘接试件的微拉伸粘接强度，场发射扫描电镜下分析断裂模式、观察界面形貌、纳米渗漏结合X射线能量色谱分析确定混合层内钙磷比值和银元素原子百分含量，并采用激光共聚焦显微镜观察牙本质表层脱矿程度。 3主要研究结果及结论 3.1本课题所用1g PA样品中含有的总酚约相当于（447±3.67）mg没食子酸标准品所含总酚。无论以乙醇或水作为溶剂，中性或碱性溶液中PA的多酚结构更易发生氧化而形成醌。建议PA溶液配制后最好保持其原有弱酸性，现配现用效果最佳。 3.2PA预处理可抑制酸处理导致的牙本质钙离子的释出、表面显微硬度的降低，并减少脱矿深度和范围。该作用呈浓度依赖性，PA浓度达到15%时效果最佳，与NaF作用相当。调节pH至中性不会明显影响PA抑制牙本质脱矿的效果。 3.3PA预处理脱矿牙本质可促进其表面的矿物沉积，沉积物主要为羟基磷灰石。其效果受PA预处理溶液pH值和PA浓度影响，应用15%PA原液预处理效果最佳。 3.4PA原液、CPP-ACP乳剂具有明显的促进脱矿牙本质再矿化的作用，生成物主要为羟基磷灰石。PA预处理脱矿牙本质表面和CPP-ACP牙面直接涂敷联合应用时对CPP-ACP促进再矿化的效果有一定程度的减弱。添加聚丙烯酸可缓解PA对CPP-ACP再矿化效果的降低作用。 3.5PA粘接预处理、粘接界面表面局部应用CPP-ACP或两者联合应用均可提高粘接界面耐pH循环老化能力，且联合应用效果优于单独应用，发挥促进矿化和稳定胶原的协同作用。PA用于粘接预处理或浸泡粘接试件或两者联合应用均可提高界面耐pH循环老化作用，但联合应用并不优于单独应用。PA预处理促进粘接界面内矿物沉积的作用并不明显。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R783.3

【参考文献】