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Bmi-1缺失导致小鼠牙和下颌骨发育障碍

发布时间:2020-07-25 17:54
【摘要】:目的探讨Bmi-1基因在小鼠牙齿和下颌骨发育中的作用。方法利用利用影像学、组织学和组织化学及图像分析方法比较分析了2~4周龄同窝野生型和Bmi-1基因敲除小鼠牙齿和下颌骨的表型差异。结果与同窝野生型小鼠相比,Bmi-1基因敲除小鼠牙齿和下颌骨矿化明显降低;牙量和下颌骨骨量也明显降低;成骨细胞数和碱性磷酸酶阳性面积明显降低,而TRAP阳性破骨细胞数无明显变化。结论 Bmi-1基因缺失引起小鼠牙形成和成骨细胞骨形成降低导致小鼠下颌骨牙量和骨量降低。因此,Bmi-1具有促进牙和下颌骨发育的作用。
【图文】:

电压图,HE染色,扩增产物,基因型鉴定


仅有Bmi-1扩增产物为687 bp条带为野生型,仅有NEO扩增产物399 bp条带为纯合子, 2条扩增产物均有者为杂合子(图1)。+/+:野生型;-/-: Bmi-1纯合子; +/-: Bmi-1杂合子图1 小鼠的基因型鉴定Fig1 Identification ofmouse genotypes1. 2. 2 取材 小鼠生长至2、3、4周以后,常规颈椎脱臼处死,解剖分离小鼠的下颌骨, 4%多聚甲醛固定过夜。左侧下颌骨用于X射线摄影和显微CT检测;右侧下颌骨用乙二胺四乙酸在4℃脱钙15~20d,常规脱水,石蜡包埋,按下颌第一磨牙近中根管颊舌向作5μm连续切片。切片标本用于HE染色和组织化学染色。1. 2. 3 X射线摄影 未脱钙的野生型和纯合子小鼠的下颌骨使用Faxitron model 805 radiographic in-spection system(德国Faxitron Contact公司)进行摄片, (电压22 kV

柱状图,周龄,小鼠,图片


2. 3 Bmi-1缺失对成牙影响为了明确Bmi-1-/-小形成障碍有关,我们利用法,观察了4周龄同窝野细胞的形态变化,并定量本质厚度的变化。结果显胞呈柱状规则排列,而Bm列紊乱。第一磨牙根管及析结果发现在Bmi-1-/-小显降低(图4A、B)。提示低可能与成牙本质细胞形2. 4 Bmi-1缺失对下颌骨为了明确Bmi-1-/-小

的影响,骨量,小鼠,下颌骨


图3 Bmi-1缺失对小鼠牙量和下颌骨骨量的影响Fig3 Effect ofBm i-1deficiency on tooth volum e and mandible bone volum emi-1缺失对下颌骨破骨细胞骨吸收的影响了明确Bmi-1-/-小鼠下颌骨骨量降低是否与胞骨吸收能力加强有关,我们利用TRAP组染色及图像分析的方法,观察了牙槽骨破骨细胞数的改变。结果显示:TRAP阳性的数在Bmi-1-/-小鼠与野生型小鼠没有显著性6)。说明Bmi-1缺失引起的下颌骨骨量降于破骨细胞骨吸收增加造成的。育异常,如通过茜红素和奥新蓝双染揭

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