新疆博州地区三民族儿童口腔白色念珠菌分布及其与患龋的相关性研究

发布时间：2020-08-21 06:29

【摘要】：目的:通过检测新疆博州地区三民族(维吾尔族、蒙古族、汉族)3~5岁儿童口腔菌斑中白色念珠菌的分布与低龄儿童龋病的相关性,并分析三民族间白色念珠菌基因多态性的差异,为新疆博州地区三民族3~5岁儿童龋病的防治提供理论依据。方法:运用多阶段、分层、整群抽样、随机数字表法,对新疆博尔塔拉蒙古自治州3~5岁儿童进行横断面研究,样本人数共1089名,其中蒙古族136名、维吾尔族403名、汉族550名;男性568名、女性521名。将其按标准分为低龄儿童龋(early childhood caries,ECC)组786名,无龋(caries free,CF)组303名。分别采集有龋组龋坏牙体组织样本,无龋组龈上菌斑,运用科玛嘉念珠菌显色培养基分离培养、革兰染色、芽管实验、PCR及内转录间隔区测序进行鉴定,PCR-25SrDNA法进行基因分型。将不同基因型白色念珠菌与其检出率、民族、性别、龋失补牙数分级的关系运用Pearsonχ~2检验和趋势χ~2相关分析进行统计学分析。结果:(1)样本的检测结果为,ECC组白色念珠菌检出率为[14.4%(113/786)],CF组为[7.6%(23/303)],两组间差异有统计学意义(χ~2=9.214,P=0.002);蒙古族、维吾尔族、汉族白色念珠菌检出率分别为[11.8%(16/136)]、[17.9%(72/403)]、[8.7%(48/550)],三民族间差异有统计学意义(χ~2=17.848,P0.001)。(2)在男性儿童中,蒙古族、维吾尔族、汉族白色念珠菌检出率分别为[10.0%(8/80)]、[21.7%(44/203)]、[8.4%(24/285)],三民族男性检出率差异具有统计学意义(χ~2=18.887,P0.001)。(3)在女性儿童中蒙古族、维吾尔族、汉族白色念珠菌检出率分别为[14.3%(8/56)]、[14.0%(28/200)]、[9.1%(24/265)],三民族女性检出率差异无统计学意义(χ~2=3.206,P=0.201)。(4)在ECC组中维吾尔族、汉族白色念珠菌检出率与龋失补牙数分级具有显著相关性(维吾尔族:趋势χ~2=11.11,P=0.001;汉族:趋势χ~2=8.15,P=0.004)。(5)在检出的136例白色念珠菌样本进行PCR-25SrDNA分型,共3型,以A型为主[55.1%(75/136)]。结论:新疆博州地区维吾尔族低龄儿童口腔内易定植白色念珠菌;男性维吾尔族儿童携带白色念珠菌者更易患龋;携带白色念珠菌为ECC的可能致病因素;白色念珠菌无特殊致龋基因型,携带白色念珠菌基因型与民族并无关联。
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R788.1
【图文】：

白色念珠菌,鉴定结果,菌株

图三白色念珠菌100倍镜下图四白色念珠菌芽管实验100倍镜下Fig3 Candida albicans Gram stain Fig4 Candida albicans tubes test1.5 白色念珠菌PCR鉴定将样本的DNA为模板，与引物合成扩增，将扩增后产物行电泳，结果均为明亮单一的250bp条带，其中Marker为DL2000 ，1号样本为标准菌株ATCC90028，2~21号为各民族口腔检出的白色念珠菌，22号为阴性对照,如图5。

白色念珠菌,测序,分子鉴定,可靠度

Fig5 The result of PCR amplication1.6 白色念珠菌ITS测序分子鉴定测序结果显示均为白色念珠菌，且可靠度≥98%，如图6、7。16

白色念珠菌,同源性,检出率

图 6 白色念珠菌 ITS 测序Fig6 ITS gene sequence of Candida albicans图7 白色念珠菌blast 检测同源性Fig7 homology of Candida albicans2 三民族儿童口腔菌斑中白色念珠菌的分布见表1、2。总样本中，ECC 组白色念珠菌检出率[14.4%（113/786）]显著高于CF组[7.6%（23/303）]，两组间差异具有统计学意义（χ2=9.214，P=0.002）。在蒙古族儿童中，ECC组白色念珠菌检出率[13/107(12.2%)]高于CF组[3/29(10.3%)]，差异无统计学意义（χ2=0.000，Ｐ=1.000）。维吾尔族儿童中，ECC组白色念珠菌检出率[59/293 ( 20.1% ) ] 高于CF组[ 13/110 ( 11.8% )]

【参考文献】