TGF-β3促进rDPSCs成骨向分化的体外实验研究

发布时间：2020-09-08 14:05

　　 目的:探讨转化生长因子β3(transforming growth factorβ3,TGF-β3)体外联合兔牙髓干细胞(rabbit dental pulp stem cells,rDPSCs)诱导其成骨向分化的效果及其作用机制。方法:酶解组织块法分离获得rDPSCs;将第三代rDPSCs分为实验组(rDPSCs+80ng/mL TGF-β3),对照组(rDPSCs+矿化液)和空白组(rDPSCs),三组细胞分别培养第7、14 d行ALP活性定量检测;第3、7、14 d免疫细胞化学染色法行COL-IA1、OCN,Runx-2染色;第7、14 d RT-qPCR检测各组ALP、COL-1A1、OCN、Runx-2、OPN、BSP、Smad4表达水平;培养第7、14、28d茜素红染色观察矿化结节。结果:成功分离获得rDPSCs;实验组ALP含量明显高于对照组和空白组(P0.05);免疫细胞化学染色结果示实验组成骨蛋白表达明显强于其余两组;COL-1A1、Runx-2、OPN、BSP、Smad4基因的表达均高于空白组(P0.05);COL-1A1、Smad4基因的表达高于对照组(P0.05);实验组矿化结节较其余两组明显。结论:TGF-β3体外有效促进rDPSCs成骨向分化,缩短成骨形成的时间;TGF-β3促进rDPSCs成骨向分化可能通过激活Smad通路来实现。
【学位单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R78
【部分图文】：

新疆医科大学硕士学位论文结 果1 rDPSCs 形态学观察酶解组织块法成功分离获得 rDPSCs,48h 即可见组织块儿周围爬出来的原代细胞（图 1A），细胞贴壁生长，形态多呈梭形和纺锤形，少数呈三角形、多角形。约 6-8汇合达到 80%-90%，进行首次传代，随培养时间和代数增加细胞形态单一呈长梭形（图 1B）。

新疆医科大学硕士学位论文实验组 3d 即出现 COL-IA1 强阳性(图 2)，Runx-2 第 7d 强阳性（图 3），OCN 出现弱阳性，第 14d 强阳性(图 4)；对照组 7d 出现 COL-IA1 阳性,第 7d 出现 Run阳性，第 14d 出现 Runx-2 强阳性、OCN 弱阳性；空白组第 7d 出现 COL-1A1 性，14d Runx-2 弱阳性，OCN 为阴性。3 免疫细胞化学染色结果

实验组3 实验第 7d Runx-2 免疫细胞化学染色结果（20munohistochemical staining for Runx-2 after 7d白组 对照

【参考文献】

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本文编号：2814268