腺病毒介导表皮生长因子体外转染人牙髓干细胞对其增殖的影响

发布时间：2020-09-10 16:31

　　 目的：通过体外培养人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs),观察重组腺病毒介导的表皮生长因子(recombinant adenovirus mediated epidermal growth factor, rAd-EGF)转染至hDPSCs后对其生长、增殖和凋亡的影响,为EGF对hDPSCs的作用提供实验依据,并为牙齿缺损与牙再生提供可能的新思路和新方法。方法：1.常规收集对数生长期的hDPSCs,将密度为1×105/ml的细胞悬液接种至6孔板中,每孔细胞悬液量为2ml,根据实验目的分为空白组(只有hDPSCs和培养基)、阴性对照组(转染rAd-EGFP的hDPSCs)和实验组(转染rAd-EGF的hDPSCs),待24h细胞贴壁后转染rAd-EGFP与rAd-EGF,在72h后采用RT-PCR检测rAd-EGF转染hDPSCs后对EGF mRNA表达的影响情况。2.体外培养hDPSCs,常规收集对数生长期的hDPSCs,将密度为4×103/ml的细胞悬液接种于96孔板中,每孔细胞悬液量为200μl,根据实验目的分为空白组、阴性对照组和实验组。待24h细胞贴壁后转染rAd-EGFP与rAd-EGF,在1、3、5、7、9、11d的同一时点,采用MTT比色法观察rAd-EGF转染hDPSCs后对其体外增值能力的影响。3.常规收集对数生长期的hDPSCs,将密度为3×106/ml的细胞悬液接种于6孔板中,每孔中的细胞贴壁后转染rAd-EGFP与rAd-EGF,继续培养48h,用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测rAd-EGF转染hDPSCs后的凋亡情况。结果：实验组hDPSCs中EGFmRNA的表达水平相对于阴性对照组与空白组均明显上调(P0.05)。与阴性对照组与空白组比较,实验组hDPSCs体外增殖能力明显升高,第1-7天升高明显,有显著性差异(P0.05),但7天后减弱,无显著性差异(P0.05)。流式细胞Annexin V-FITC/PI法结果显示在作用时间相同的情况下同阴性对照组与空白组相比,实验组hDPSCs体外凋亡指数明显降低(P0.05)。结论：rAd-EGF转染入hDPSCs, EGF mRNA的表达量增加,在短期内对其增殖能力具有促进作用,对其凋亡具有抑制作用。
【学位单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2012
【中图分类】：R78

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 徐皑;付广丽;刘兴容;鲍艳;;腺病毒介导表皮生长因子体外转染人牙髓干细胞对其凋亡的影响[J];海南医学;2013年13期

2 何泓志;麻丹丹;;影响牙髓干细胞分泌血管内皮生长因子的因素[J];中国组织工程研究;2020年01期

3 赵越;;牙髓干细胞的研究进展[J];医学信息;2018年02期

4 王娟;刘宝刚;马逢乐;何欣遥;王志华;何文喜;;他莫昔芬对牙髓干细胞体外分化的影响[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2015年05期

5 毛丽霞;刘加强;赵晶蕾;王洁;夏韫晖;王博;袁玲君;房兵;;人牙髓干细胞体外成骨向分化的实验研究[J];口腔颌面修复学杂志;2014年04期

6 马蓉;董棣文;木合塔尔·霍加;;从牙髓干细胞到组织化工程牙[J];新疆医学;2012年06期

7 刘振山;耿传营;刘玉凤;;牙髓干细胞的研究与进展[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年34期

8 万千千;侯立鹏;韩冰;倪龙兴;王玮;;碱性成纤维细胞生长因子对3D培养条件下牙髓干细胞成牙分化的研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2018年03期

9 吴相周;潘爽;李艳萍;何丽娜;张巍巍;牛玉梅;;模拟微重力对人牙髓干细胞细胞骨架及迁移能力影响的研究[J];口腔医学研究;2015年02期

10 董海波;李艳萍;牛玉梅;张巍巍;甘友华;;模拟微重力对人牙髓干细胞微丝及细胞迁移能力的影响[J];口腔医学研究;2012年07期

相关会议论文 前10条

1 葛兴云;陆嘉敏;李泽汉;潘引;李娜;庞希瑶;于金华;;重组人甲状旁腺素1-34对人牙髓干细胞牙/骨向分化的影响[A];2018全国口腔生物医学学术年会论文汇编[C];2018年

2 李蓓;;牙髓干细胞再生牙髓并促进牙齿发育的基础及临床研究[A];2018口腔病理年会暨第十二次全国口腔病理学术会议论文集[C];2018年

3 王玉栋;李张维;康成容;周折冲;董诗怡;潘宣;;牙髓干细胞在牙髓再生治疗中的前景研究[A];中华口腔医学会第九次全科口腔医学学术会议论文汇编[C];2018年

4 徐方芳;蒋备战;;浓缩生长因子对脂多糖感染状况下的人牙髓干细胞增殖、迁移和分化的影响[A];中华口腔医学会第十一次全国牙体牙髓病学学术大会论文汇编[C];2018年

5 潘引;李泽汉;俞艳;雷港;汪延秋;庞希瑶;闫明;于金华;;Hsa-let-7b/MMP1调控轴在人牙髓干细胞成牙成骨向分化中的作用及机制[A];2017全国口腔生物医学学术年会论文汇编[C];2017年

6 邹朝晖;沈静燕;刘士有;;牙髓干细胞的研究进展及应用(综述)[A];天津市生物医学工程学会2006年学术年会论文摘要集[C];2006年

7 吴金燕;沈宗杉;黄舒恒;陈玲玲;邝树鸿;林正梅;GAO Xian-ling;;牙髓干细胞外泌体促进牙周骨损伤修复的实验研究[A];第十三次全国老年口腔医学学术年会论文汇编[C];2018年

8 王超;曹钰;夏登胜;;分泌型卷曲相关蛋白2促进牙髓干细胞成骨/成牙向分化[A];中华口腔医学会第十一次全国牙体牙髓病学学术大会论文汇编[C];2018年

9 潘爽;何丽娜;吴相周;王田田;牛玉梅;;模拟微重力对人牙髓干细胞生物学性状的影响[A];2014年第九次全国牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2014年

10 吕长胜;翟旭;;大鼠牙髓干细胞分化成骨样细胞能力研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

相关重要报纸文章 前6条

1 记者 王蔚佳;“救命火种”牙髓干细胞来了[N];第一财经日报;2016年

2 记者 张忠霞;用猴子牙髓干细胞能刺激脑细胞生长[N];新华每日电讯;2008年

3 杨昆;表皮生长因子[N];中国医药报;2002年

4 杨昆;表皮生长因子——修复健康与美丽[N];经济参考报;2002年

5 杨昆;神奇的表皮生长因子[N];山东科技报;2002年

6 曾繁玉 魏妍平;表皮生长因子研究获突破[N];健康报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 许忆峰;人乳牙牙髓干细胞联合高压氧治疗2型糖尿病大鼠疗效观察与机制探讨[D];中国人民解放军海军军医大学;2019年

2 田松波;CGF促进牙髓组织修复重建的实验及临床研究[D];河北医科大学;2018年

3 郭红延;大鼠牙髓干细胞培养鉴定及生物学特性研究[D];第四军医大学;2004年

4 贺慧霞;牙髓干细胞分离鉴定及其制备组织工程化牙本质牙髓复合体的实验研究[D];第四军医大学;2005年

5 王亦菁;牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究[D];第四军医大学;2005年

6 于金华;牙髓干细胞形成牙体组织能力及其制备嵌合体牙齿的实验研究[D];第四军医大学;2007年

7 刘影;Toll样受体4对人牙髓天然免疫反应调控的初步研究[D];南方医科大学;2014年

8 赵秀;MTA调控人牙髓干细胞分化的分子机制的研究[D];第四军医大学;2010年

9 文军;改良富血小板血浆对乳牙牙髓干细胞增殖和成骨分化的作用研究[D];南方医科大学;2014年

10 陈明;miR-586在牙毮干细胞/内皮前体细胞共培养成牙本质向分化和成血管中作用机制的实验研究[D];南方医科大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 付广丽;腺病毒介导表皮生长因子体外转染人牙髓干细胞对其增殖的影响[D];泸州医学院;2012年

2 鲍艳;重组腺病毒介导的人表皮生长因子基因体外转染人牙髓干细胞的研究[D];泸州医学院;2012年

3 宁婷婷;脂多糖对不同鼠龄牙髓干细胞增殖及矿化特性影响的实验研究[D];南方医科大学;2019年

4 艾力麦尔旦·艾尼瓦尔;TGF-β3促进rDPSCs成骨向分化的体外实验研究[D];新疆医科大学;2019年

5 李鹏;BMP-2与TGF-β3对DPSCs成骨向分化的对比研究[D];新疆医科大学;2019年

6 杨雪;载rhVEGF_(165)邻苯二酚壳聚糖促乳牙牙髓干细胞血管形成的研究[D];吉林大学;2019年

7 王宇琛;人脱落乳牙牙髓干细胞在乳牙生理性根吸收中调控作用机制的研究[D];中国人民解放军医学院;2018年

8 葛芳;人牙髓干细胞分化为角膜上皮样细胞的可行性研究[D];山东大学;2019年

9 孙观文;CGF、PRF对人牙髓干细胞增殖、成牙本质分化及相关因子表达的比较研究[D];福建医科大学;2018年

10 林静;牙髓干细胞/PGA支架在TDM上构建牙周支持组织的研究[D];福建医科大学;2018年

本文编号：2816041