熊果酸对舌癌细胞Tca8113生长及迁移的影响及相关机制研究

发布时间：2020-09-24 05:05

　　 目的观察熊果酸对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞体外生长及迁移能力的影响,并探讨其相关机制。方法采用MTT法及克隆形成实验法检测熊果酸对Tca8113细胞活性的影响;采用划痕实验法检测熊果酸在0h、12h、24h对Tca8113细胞迁移能力的影响;通过Hoechst33342染色和流式细胞术实验检测熊果酸对Tca8113细胞凋亡的影响;Western blot检测熊果酸对Tca8113细胞中p-Fak、Fak、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果MTT法检测结果表明,不同浓度的熊果酸可以不同程度的抑制Tca8113细胞的活性,与对照组相比较差异明显(P0.05),且细胞生长抑制率与药物浓度呈正相关;克隆形成实验结果显示实验组细胞生长缓慢,包含克隆数少,实验结束时细胞存活量少,几乎处于静止期,表明熊果酸能抑制Tca8113细胞的活性;划痕实验结果显示实验组明显比对照组距离宽,迁移率和作用的时间呈负相关,说明熊果酸可对Tca8113细胞的迁移起到抑制作用;Hoechst33342染色及流式细胞术检测结果显示在熊果酸作用0h、12h、24h后可见凋亡逐渐增加,表明熊果酸能诱导Tca8113细胞凋亡(P0.05),并呈时间依赖性。Western blot结果显示,熊果酸抑制Bcl-2以及增强Bax的表达,导致Cleaved caspase-3的表达增强(P0.05),促进Tca8113细胞凋亡;降低p-Fak、Fak的表达,而影响Tca8113细胞迁移。结论熊果酸对舌癌细胞Tca8113生长及迁移有明显抑制作用并促进其凋亡,其机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡通路及抑制Fak的激活有关。
【学位单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R739.86
【部分图文】：

图 1 不同浓度熊果酸对 Tca8113 细胞 24h 活性的影响：与 0μmol/L 组比较，* P <0.05。形成实验检测熊果酸对 Tca8113 细胞活性的影响成实验显示实验组细胞生长缓慢，包含克隆数少，实验结束时

酸具有显著抑制人舌癌细胞体外克隆形成的能力。a b c图2 不同浓度的熊果酸对细胞克隆形成的影响注：a浓度为0 μmol/L, b浓度为40 μmol/L, c浓度为80 μmol/L,与a比较，**P<0.01。

图 3 Hoechst33342 染色观察细胞凋亡情况四、流式细胞术分析 Tca8113 细胞的凋亡率Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率的结果如图 4 所示。随着时间的移，实验组的总凋亡率明显上升，且主要是晚期凋亡引起的，与实验组相比较

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本文编号：2825343