扫描电镜下绿茶提取液对早期牙釉质龋再矿化作用的初步研究

发布时间：2020-09-29 10:21

　　目的:通过扫描电镜观察绿茶提取液作用于早期牙釉质龋后釉质的表面形态,并结合图像分析电镜下釉面微孔隙面积,评价其再矿化效果,为天然产物防龋的研发提供理论依据。方法:(1)选择因正畸新鲜拔除的前磨牙15颗(要求无龋损、无隐裂、无充填物),超声清洗,于颈部分离冠根,去除软组织,沿牙长轴纵劈牙冠成两部分,形成30个牙釉质标本,留颊或舌面约4mmx4mm开窗区,其余部分用指甲油封闭。随机选取其中6个釉质块作为正常釉面结构的电镜观察,剩余部分进行脱矿处理;脱矿后随机选取6个釉质块作为脱矿组进行扫描电镜观察;剩余18个脱矿后的牙釉质块随机分为3组,绿茶提取液组、2mg/L氟化钠组(阳性对照组)和去离子水组(阴性对照组),每组6个样本,进行pH循环实验。(2)pH循环实验:将实验溶液、再矿化溶液及脱矿溶液每次均按每个标本10ml加入。每日循环包括先在脱矿液中处理4h,等量的去离子水、氟化钠、绿茶提取液处理6h,再浸入等量的再矿化液中过夜。每换一种处理液前用200ml去离子水振荡冲洗5min,连续循环10d。整个循环完成后,所有标本经去离子水冲洗10min,贮存于4℃含0.05 mmol/L麝香草酚的去离子水中待检。(3)扫描电镜观察脱矿前后及经不同实验溶液处理后各组牙釉质的表面形态,图像分析电镜下釉面微孔隙面积。结果:(1)肉眼观察:各组釉质块表面完整,脱矿后可见开窗区牙釉质呈白垩色,pH循环实验后绿茶提取液组开窗区剖面变为棕黄色,去离子水组及氟化钠组未见着色改变。(2)扫描电镜结果显示:脱矿前釉质表面光滑平坦,可见少量细小磨痕。脱矿后低倍镜下见牙釉质表面高低不平,可见釉柱轮廓和一些磨痕,有明显的微孔隙出现,高倍镜下见釉面有较大的凹坑,并有散在的空隙,呈凹凸不平的蜂窝状结构。pH循环实验后:低倍镜下绿茶提取液组牙釉质表面较为平整,氟化钠组牙釉质表面较为平整但粗糙,其中绿茶提取液组釉面微孔隙几乎全部被覆盖,氟化钠组釉面微孔隙大部分被覆盖,仍有少量微孔隙,高倍镜下绿茶提取液组可见新形成的晶体结构。去离子水组低倍镜下牙釉质表面不平整,有明显的微孔隙出现,高倍镜下见结构疏松,大量散在的孔隙尚存。(3)pH循环实验后,绿茶提取液组和氟化钠组釉面微孔隙面积均较脱矿组显著减小(P0.01),其中绿茶提取液组釉面微孔隙面积小于氟化钠组(P0.05),去离子水组釉面微孔隙面积与脱矿组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:(1)脱矿牙釉质表面经绿茶提取液和氟化钠处理后,均能促进釉质的再矿化,其效果明显优于单纯人工再矿化液。(2)脱矿牙釉质表面经绿茶提取液处理后,表面沉积物较氟化钠处理致密、均匀,晶体结构典型,提示可能除了氟元素外茶叶中还有其它成分参与牙釉质的再矿化。(3)绿茶提取液成分较为丰富,对再矿化具有积极作用,可以充分利用其来开展地方天然药物防龋。
【学位单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R781.1
【部分图文】：

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（2）脱矿后：各组牙釉质块经脱矿处理后均有明显脱矿。低倍镜下见釉质表平，可见釉柱轮廓和一些磨痕，有明显的微孔隙出现。高倍镜下见脱矿有较大并有散在的空隙，呈凹凸不平的蜂窝状结构（图 2a、b）。（3）pH 循环实验后各组牙釉质的表面形态:绿茶提取液组：低倍镜下见牙釉质表面平整，釉面微孔隙几乎全部被覆盖，提矿物质沉积。高倍镜下见新形成的晶体结构（图 3a、b）。氟化钠组：低倍镜下见牙釉质表面较为平整但粗糙，釉面微孔隙大部分被覆盖量微孔隙，提示有少量矿物质沉积。高倍镜下釉质表面可见排列凌乱的球形颗填补了表面上的绝大多数裂隙和凹坑（图 4a、b）。去离子水组：低倍镜下牙釉质表面不平整，有明显的微孔隙出现。高倍镜下见，大量散在的孔隙尚存（图 5a、b）。

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图 2 脱矿后釉质表面的 SEM 照片，a: ×498, b: ×4000Fig. 2 SEM photograph of enamel surface after demineralization , a: ×498, b: ×4000

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13图 3 脱矿釉质经绿茶提取液处理后的 SEM 照片，a: ×500, b: ×4000Fig. 3 SEM photograph of demineralization enamel after treated by green tea extracts ,a: ×500, b: ×4000

【参考文献】