舌鳞癌细胞微环境对小鼠树髓源性树突状细胞生长分化影响
发布时间：2020-10-10 03:04
目的:利用不同剂量的人舌鳞癌细胞Tca8113培养上清液模拟肿瘤发展不同时期肿瘤微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化及功能的影响,并探讨其发生的可能机制。 方法:利用无菌小鼠长骨骨髓细胞,对照组在常规重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白介素-4(rmIL-4)培养液中培养,诱导分化为DCs;实验组在上述培养液中再加入不同剂量的舌鳞癌细胞株Tca8113培养上清液。培养第六天收集各组悬浮细胞,部分细胞台酚蓝染色法计活细胞数,流式细胞术检测DCs表型(CD86、CD11c、MHC-Ⅱ)表达;部分细胞加入LPS观察其对外源性刺激的反应,流式细胞术检测经LPS刺激后DCs表型CD86、CD11C、MHC-Ⅱ表达,混合淋巴细胞增殖实验比较其在体外刺激T淋巴细胞增殖能力 结果:tca8113微环境下可诱导培养出具有典型形态和免疫表型的树突状细胞;低剂量tca8113培养上清液微环境刺激增强刺激DCs成熟,中等剂量tca8113培养上清液微环境不影响DCs成熟,但能促进骨髓前体细胞分化为imDC;高剂量tca8113培养上清液微环境抑制DCs分化成熟;中等剂量cs-tca8113微环境下诱导imDC具有抵抗外源性抗原刺激成熟能力。 结论:成功建立舌鳞癌微环境下树突状细胞诱导分化模型;舌鳞癌微环境对树突状细胞分化影响的多样性可能与环境中免疫因子浓度密切相关。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R739.8
【部分图文】：
2 实验结果2.1不同剂量cs-tca8113干预下获得的树突状细胞数量肿瘤微环境下获得的DCs数量随cs-tca8113剂量增加有逐步减少趋势（图1）。低剂量cs-tca8113干预下获得的DCs（1 、2组）数量大于对照组、中剂量组中4 、5 、6组、大剂量组（7、8组），且差异有统计学意义P<0.05；中等剂量组（group 3、4 、5、6）生成DC数量与对照组接近，差异无统计学意义 P>0.05；高剂量组生成DCs显著低于其他3组，p<0.05。（表1）
2.2 树突状细胞表免疫型检测分析在模拟舌鳞癌微环境下，骨髓前体细胞成功诱导分化为具有典型免疫表型DCs，见图2；随cs-tca8113剂量逐步增大，MHC-Ⅱ+CD86表达有逐步减弱趋势，MHC-Ⅱ表达逐渐增强趋势（图2）。MHC-Ⅱ+CD86表达：对照组与group 1、2、3、4、7、8 差异有统计学意义，p<0.05;低剂量组（1、2组）与对照组、中剂量组、高剂量组对比差异有MHC-Ⅱ:对照组与高剂量组、5组、6、组差异有显统计学意义，p<0.05；高剂量组（7、8组）与低剂量组、高剂量组、对照组相比有显著性差异 p<0.05；著性 P<0.05；低剂量组、3组、4组之间无明显差异 p>0.05（表1）。3 讨论DCs 是迄今为止发现的功能最强的抗原提呈细胞（APC）, 是机体获得性免疫的关键[19-20]。肿瘤微环境的免疫抑制作用机制之一就是肿瘤细胞分泌多种免疫抑制因子形成局部高强度免疫抑制区。免疫抑制因子主要通过三条途径抑制 DCs 抗原。呈递功能：一.抑制骨髓前体细胞 CD34+分化为 DCs，减少树突状细胞数目；
HCⅡCD8669.83±1.36 69.81±1.83 89.67±2.70 62.85±3.50HCⅡ 3.77+0.50 14.54±0.49 1.36±0.54 13.21±1.00.2 肿瘤微环境抑制髓源性小鼠树突状细胞刺激 T 淋巴细胞增殖能力对照组 DC 刺激 T 淋巴细胞增殖 SI=2.86±0.29,，经 LPS 刺激后 LPS+DC T 细胞增殖活性明显提高 SI=4.02±0.09 p<0.05; tca8113-DC 刺激淋巴细胞能力与 DC、LPS+DC 相比明显下降（SI=2.03±0.19），p<0.05;tca8113-DCPS 刺激后，LPS+tca8113-DC 诱导淋巴细胞增殖能有一定提高，但两者之间差统计学意义。图 3
本文编号：2834627
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R739.8
【部分图文】：
2 实验结果2.1不同剂量cs-tca8113干预下获得的树突状细胞数量肿瘤微环境下获得的DCs数量随cs-tca8113剂量增加有逐步减少趋势（图1）。低剂量cs-tca8113干预下获得的DCs（1 、2组）数量大于对照组、中剂量组中4 、5 、6组、大剂量组（7、8组），且差异有统计学意义P<0.05；中等剂量组（group 3、4 、5、6）生成DC数量与对照组接近，差异无统计学意义 P>0.05；高剂量组生成DCs显著低于其他3组，p<0.05。（表1）
2.2 树突状细胞表免疫型检测分析在模拟舌鳞癌微环境下，骨髓前体细胞成功诱导分化为具有典型免疫表型DCs，见图2；随cs-tca8113剂量逐步增大，MHC-Ⅱ+CD86表达有逐步减弱趋势，MHC-Ⅱ表达逐渐增强趋势（图2）。MHC-Ⅱ+CD86表达：对照组与group 1、2、3、4、7、8 差异有统计学意义，p<0.05;低剂量组（1、2组）与对照组、中剂量组、高剂量组对比差异有MHC-Ⅱ:对照组与高剂量组、5组、6、组差异有显统计学意义，p<0.05；高剂量组（7、8组）与低剂量组、高剂量组、对照组相比有显著性差异 p<0.05；著性 P<0.05；低剂量组、3组、4组之间无明显差异 p>0.05（表1）。3 讨论DCs 是迄今为止发现的功能最强的抗原提呈细胞（APC）, 是机体获得性免疫的关键[19-20]。肿瘤微环境的免疫抑制作用机制之一就是肿瘤细胞分泌多种免疫抑制因子形成局部高强度免疫抑制区。免疫抑制因子主要通过三条途径抑制 DCs 抗原。呈递功能：一.抑制骨髓前体细胞 CD34+分化为 DCs，减少树突状细胞数目；
HCⅡCD8669.83±1.36 69.81±1.83 89.67±2.70 62.85±3.50HCⅡ 3.77+0.50 14.54±0.49 1.36±0.54 13.21±1.00.2 肿瘤微环境抑制髓源性小鼠树突状细胞刺激 T 淋巴细胞增殖能力对照组 DC 刺激 T 淋巴细胞增殖 SI=2.86±0.29,，经 LPS 刺激后 LPS+DC T 细胞增殖活性明显提高 SI=4.02±0.09 p<0.05; tca8113-DC 刺激淋巴细胞能力与 DC、LPS+DC 相比明显下降（SI=2.03±0.19），p<0.05;tca8113-DCPS 刺激后，LPS+tca8113-DC 诱导淋巴细胞增殖能有一定提高，但两者之间差统计学意义。图 3
【参考文献】
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3 李淑英,张科,芦薇;EB病毒致胃癌的研究进展[J];中国综合临床;2005年10期
4 黄海力,吴本俨,尤纬缔,申明识,王文菊;树突状细胞浸润对进展期胃癌生物学行为和预后的影响[J];中华肿瘤杂志;2003年05期
5 周同,宋长玲;细胞粘附分子、粘附蛋白与肿瘤转移[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1995年03期
本文编号：2834627
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