rhPDGF-BB对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞FAK表达的影响

发布时间：2020-10-14 10:08

　　 骨吸收速度是决定正畸牙移动效率的关键性因素之一。血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)作为骨代谢中重要的细胞因子,既可以促进成骨细胞增殖,又参与破骨过程。前期系列实验表明:在大鼠正畸牙牙周局部注射低剂量重组人血小板衍生生长因子-BB(recombinant human platelet derived growthfactor-BB,rhPDGF-BB)后,压力侧破骨细胞计数增加,整合素α_vβ_3表达增强,从而加速了正畸牙的移动。黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是整合素α_vβ_3介导的细胞内信号传导重要环节的激酶,对于破骨细胞募集、黏附以及细胞内骨架的重组发挥着重要的作用。本实验将观察外源性rhPDGF-BB对正畸牙移动骨改建过程中破骨细胞内FAK表达的影响,探讨rhPDGF-BB促进正畸牙移动的作用机制。 目的:观察rhPDGF-BB对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞内FAK表达的影响。探讨rhPDGF-BB对正畸牙移动过程骨改建中破骨细胞的作用及其下游信号通路。 方法:于SD大鼠上颌左侧第一磨牙和上切牙间安放矫治装置并施以50g力,建立大鼠上颌磨牙近中移动模型。将80只模型大鼠随机分为对照组(A组)和实验组(B组),每组40只,再按观察时间(1、4、7、10、14天)不同将A组和B组各分五个亚组(A1/B1、A4/B4、A7/B7、A10/B10和A14/B14),每组8只。实验组从动物模型建立开始每2天于左侧上颌第一磨牙颊侧粘膜处注射10ng的rhPDGF-BB,注射体积0.1ml,对照组注射相同容量的磷酸盐缓冲盐水(phosphate-buffered saline,PBS)。观察1、4、7、10、14天(从观察第二天计算)处死大鼠,多聚甲醛透心灌注固定。分别于实验前后对左上颌磨牙区取模,硬石膏灌注模型,用YR-MV1.0显微图像测量软件测量模型中正畸牙移动的距离。取大鼠左侧上颌第一磨牙及牙周组织标本,采用抗酒石酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)组织化学法观察压力侧破骨细胞数量变化,免疫组织化学方法观察破骨细胞内FAK表达变化并进行灰度值的分析。 结果:1.正畸牙移动距离测量:①随加力时间的增加,A组和B组正畸牙移动距离均增加。注射rhPDGF-BB的B组,除第1天以外,其余正畸牙移动距离均大于A组,差异有显著统计学意义(P＜0.01)。2.压力侧破骨细胞计数:①B组压力侧破骨细胞计数从加力1天开始上升,第4天达高峰,随后开始下降;A组总体趋势与B组相同,但其高峰在第7天,上升及下降均较B组平缓。②在各观察时间点,B组压力侧破骨细胞计数均大于A组(P＜0.01)。③A组组内各时间点比较差异均有显著统计学意义(P＜0.01)。B组中,除第1天与第14天比较无统计学差异(P＞0.05)外,其余各组比较差异均有显著统计学意义(P＜0.01)。3.破骨细胞中FAK的表达:①FAK的表达随时间增加先升高后下降,在各观察点B组FAK表达均高于A组(P＜0.05),表达高峰均在第4天。②组内比较,B组除第10天与14天比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余组内不同时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.05);A组除第1天与14天比较无统计学差异(P＞0.05)外,其余组内各时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论:1.rhPDGF-BB作为局部调节因子促进了正畸牙移动骨改建过程。2.在大鼠正畸牙压力侧牙槽骨改建的过程中,FAK参与了整合素α_vβ_3在破骨细胞信号转导的下游通路,其表达能被外源性的rhPDGF-BB所调节。
【学位单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R783.5
【部分图文】：

0.20~的结扎丝穿过大鼠左上领第一和第二磨牙之间环扎第一磨牙，将镍钦螺旋拉簧的一端固定于第一磨牙的近中并用测力计测量拉簧拉力为509，另一端用结扎丝固定于前牙沟槽内，形成正畸牙加力装置(图1)。为防止加力装置咬断;减少上前牙因与下前牙咬合磨耗所导致的萌出，磨短下前牙。在实验第1、3、5、7、9、11、13d(从加力当天计算)，将大鼠麻醉后，于第一磨牙颊侧牙跟粘膜下注射IO0ng/ml的PDGF一 BB0.lml，对照组注射等量PBS，每次注射时根据上下前牙萌出的情况选择性磨短下前牙，并检查正畸矫治装置，清洁大鼠口腔。术后予以鸡蛋等软食饲养，自由饮水。图1大鼠正畸模型加力装置 Fig1DiagramoforthodontiesaPPlianee2.3实验动物分组SD大鼠随机分为两个大组:对照组(A组)和实验组(B组)，每组40只。再按观察时间(1、4、7、10、14d)不同将A组和B组各分五个亚组(Al忍1、A4旧4、A7厄7、A10忍10和A14忍14)，每个亚组8只。B组从动物模型建立开始

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【参考文献】

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本文编号：2840530