新生鼠皮肤表皮细胞牙源性上皮方向分化的实验研究

发布时间：2020-12-02 11:53

　　牙齿的发生和发育是由上皮和间充质在一系列信号分子组成的信号网络的精确调控下完成的。因此牙齿的生物性再生至少需要两种细胞:上皮源性细胞和间充质源性细胞。目前牙源性间充质细胞的替代研究进展较快而且取得了可喜的成绩,例如成体的牙髓干细胞、骨髓基质细胞均被证明具有形成牙髓-牙本质复合体的功能。在寻找牙源性上皮细胞替代细胞方面虽然也进行了一些研究,如诱导胚胎时期口腔粘膜上皮或皮肤表皮以及成体骨髓来源的细胞向成釉细胞转化,但这些研究多建立在应用胚胎早期组织基础之上,以出生后组织为来源寻找替代细胞的研究进展有限。寻找能够向牙源性上皮方向分化的成体或出生后组织来源的细胞对解决牙齿再生研究中上皮源性种子细胞来源的瓶颈问题具有重要意义。本研究着重探讨出生后1d仔鼠的皮肤来源的表皮细胞向牙源性上皮方向分化以及参与牙齿发育的能力。本课题主要进行了以下几方面的研究:1.牙乳头间充质细胞对皮肤表皮细胞牙向分化的体外诱导研究（1）皮肤表皮细胞的体外培养与鉴定以出生1d的SD仔鼠背部皮肤为组织来源进行表皮细胞培养。采用胞外基质的黏附法对原代培养的表皮细胞进行筛选,对筛选细胞的增殖能力、细胞表型以及细胞周期的特性进行分... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

DPMCs体外矿化诱导VonKossa染色结果大体观察

图 1.25 RT-PCR 分析结果3 讨论牙源性间充质细胞在发育生物学上是牙胞。在牙齿发育过程中，牙乳头间充质在多下，其表层的细胞分化为成牙本质细胞，并的牙本质。而中心的细胞逐渐发生终末分化的牙髓组织[107,108]。牙胚间充质细胞的体外培和再生研究具有重要意义。44

说如何提供一个诱导环境能够尽可能多的包含细胞分化所是目前对细胞进行分化诱导的关键。目前研究干细胞多项分化一般都采用单因子或多因子相结，例如，牙髓干细胞的成牙本质细胞方向分化，既可以用T，也可以采用TGF-β与bFGF联合应用[114]，还可以采用地赛β-磷酸甘油共同作用而实现[115]。但不管采用上述何种方式难完全模拟体内牙齿发育当时的多因素协同作用的复杂过成牙诱导方案成为实现非牙源性上皮牙向分化的前提。因基础上，研究者不断探索新的诱导模式，即采用细胞间的图 1.29 体外诱导 6d 后 RT-PCR 结果分析ane 1:成釉器 Lane 2:诱导后表皮细胞 Lane 3:未诱导表皮细胞


本文编号：2895260