胚胎发育末期维甲酸诱导腭裂小鼠腭突细胞增殖与分化的变化

发布时间：2020-12-05 05:14

　　背景：全反式维甲酸（all-trans retinoic acid，ATRA）是维生素A的衍生物,现已被证明具有显著的致畸作用。在胚胎腭发育早期，母体摄入过量维甲酸可导致腭间充质细胞增殖水平下降而产生腭裂。但在胚胎发育末期，腭突细胞尤其是腭间充质细胞的增殖和分化程度尚未见报道。目的：在胚胎18.5天维甲酸诱导腭裂小鼠中，利用BrdU法标记慢周期细胞，并结合PCNA、Sox-2和P75等细胞增殖和分化标记物，检测腭突上皮和间充质细胞的增殖与分化水平。方法：选取10周龄左右SPF级ICR孕鼠，在胚胎10天时按100mg/kg体重维甲酸灌胃孕鼠建立腭裂动物模型。在胚胎12天按80mg/kg体重对孕鼠腹膜下注射BrdU，用以标记在胚胎18.5天处于低分裂的慢周期状态细胞。在胚胎发育末期即出生前的胚胎18.5天，将腭裂组与对照组小鼠进行灌流固定脱水包埋，利用多重免疫荧光法分别检测BrdU与Sox-2、P75及PCNA阳性细胞的分布；解离胚胎腭突上皮和间充质组织，利用实时定量PCR法检测Sox-2和75的表达水平。结果：（1）BrdU与PCNA双重荧光染色结果显示在E18.5天正常对照组中，Bru... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：36 页

【学位级别】：硕士

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材料和方法
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结论
参考文献
综述
    参考文献
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本文编号：2898943