1400W对缺氧培养的人舌鳞状细胞癌CAL-27细胞株iNOS和MMP-9表达及意义
发布时间：2020-12-05 05:58
研究背景和目的舌为口腔内鳞状细胞癌最常见的原发部位之一,多呈浸润生长,易发生早期转移。舌癌发病率近期呈增长趋势,其早期转移率为37%～85%,故研究舌鳞癌的治疗方法并为其提供理论基础有重要的意义。抗肿瘤血管形成是治疗肿瘤有效的方法,针对性的抑制相关肿瘤血管形成因子的表达是目前研究的热点。本实验在缺氧条件下给予不同剂量的诱导性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）抑制剂1400W作用不同时间,观察其对人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS活性和变化及iNOS.基质金属蛋白酶-9 （matrix metalloproteinases-9,MMP-9）表达的影响及相关性,,以探讨抑制iNOS表达,治疗舌鳞癌的可能性。研究内容和方法1.在体外正常培养条件下,实验组分别采用浓度为50,100,200,400μmol/L的1400W对相同条件CAL-27细胞作用,并设计不加1400W的细胞组为对照组,24,48,72,96h后,分别用硝酸还原酶法测定各组人舌鳞癌细胞株CAL-27细胞培养上清液中一氧化氮（Nitric oxide, NO）的含量水平；并...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺氧培养条件下140OW对CAL一27细胞培养上清液中NO含量的影响
.21400W对各组CAL一27中1NOS、MMP一9基因mRNA表达水平检1400W对各组CAL一27iNOS、MMp一9基因mRNA表达水平的影响见表及图3.及3.2.2RT一尸CR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图见见附录B图2。3.2.1不同浓度14OOW作用72h后对CAL一27中iNOS及删P一9mRNA表达的检测表3.2.1不同浓度I40OW作用72h后对细胞iNOS及MMP一9mRNA表达的影响又士s蜜别对照组0林mo盯L50林moFL100林moUL200林mo盯L400林mol/LiNOS0.248士0.0080.210士0.010#0.171士0.011*0.135士0.007*0.140士0.009*人扒护一91.05士0.021.36士0.03#0.91士0.03*0.40士0.03*0.62士0.05*注:，与对照组比较尸<0.05，#与对照组比较尸>0.05，各实验组之间比较尸<0.05
铡兰VN叱日HOdV口\︵6dl弓芝的O之叫iNOSMMP一9图3， 2.2200pmol/L1400W作用不同时间对CAL一27细胞iNOSmRNA、MMP一gmRNA表达的影响3.2.3各实验组、对照组CAL一27细胞经RT一PCR法扩增后表达水平经RT一PCR法扩增后各实验组、对照组可见 593bpGAPDH特异性扩增片段， 364bpiNOS特异性扩增片段、 172bpMMp一9特异性扩增片段见附录B图2。72h时，经不同浓度140OW处理的实验组细胞中iNOS及MMP一9的基因mRNA表达水平均随1400w浓度增加而逐渐下降。但24h、 50pm01/L组与对照组比较无统计学意义 (P>0.05)，实验组以72h，200pmOI/L抑制最为显著(P<0.05);以浓度为200“mol/L为例，经不同时间作用后各实验组细胞中iNOS及MM尸一9的mRNA表达水平均随 14O0w作用时间延长而逐渐下降，且两者的表达递减成明显相关性(P<0.05)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Notch1和表皮生长因子受体在舌鳞癌及癌前病变中的表达[J]. 黄红杰,平飞云,胡济安,赵士芳. 华西口腔医学杂志. 2009(06)
[2]iNOS抑制剂1400W对宫颈癌HeLa细胞株生长的抑制作用[J]. 叶君,孙红. 复旦学报(医学版). 2009(02)
[3]选择性iNOS抑制剂1400W对缺氧培养人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达的影响[J]. 邢宏松,黄长文,傅华群,马景胜,蔡成行. 实用临床医学. 2008(09)
[4]诱导型一氧化氮合酶在肿瘤组织中的作用[J]. 刘阳云,赵素萍. 国际检验医学杂志. 2008(05)
[5]一氧化氮与口腔黏膜癌前病变的相关性研究[J]. 方豪,张水龙,许励,曹之强,张梅. 医学研究杂志. 2007(04)
[6]Expressions of inducible nitric oxide synthase and matrix metalloproteinase-9 and their effects on angiogenesis and progression of hepatocellular carcinoma[J]. Min-Hua Sun, Xi-Chun Han, Ming-Ku Jia, Wei-Dong Jiang, Min Wang, Hong Zhang, Gang Han, Yi Jiang, Department of General Surgery, Second Hospital, Jilin University, Changchun 130041, Jilin Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(38)
[7]Increased oxidative DNA damage, inducible nitric oxide synthase, nuclear factor кB expression and enhanced antiapoptosis-related proteins in Helicobacter pylori-infected non-cardiac gastric adenocarcinoma[J]. Chi-Sen Chang Wei-Na Chen Hui-Hsuan Lin Cheng-Chung Wu Chau-Jong Wang Division of Gastroenterology,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of Gastroenterology,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of General Surgery,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaInstitute of Biochemistry,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaNational Young-Min Medical University,Taipei,Taiwan,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
[8]口腔鳞癌VEGF和NOS的表达及其相关性[J]. 李晓光,王延秀,王春,杨宪勇,王青,李毅,侯刚. 口腔医学研究. 2004(03)
[9]口腔鳞癌患者血清一氧化氮水平及其手术前后的变化[J]. 李卫星,张朝霞,张秀清,甘世新. 中国癌症杂志. 2003(01)
[10]5-氟脲嘧啶对恶性肿瘤患者血一氧化氮水平的影响[J]. 江素华,曾波航,李宇清,李丹. 实用癌症杂志. 2000(04)
本文编号：2898999
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【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺氧培养条件下140OW对CAL一27细胞培养上清液中NO含量的影响
.21400W对各组CAL一27中1NOS、MMP一9基因mRNA表达水平检1400W对各组CAL一27iNOS、MMp一9基因mRNA表达水平的影响见表及图3.及3.2.2RT一尸CR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图见见附录B图2。3.2.1不同浓度14OOW作用72h后对CAL一27中iNOS及删P一9mRNA表达的检测表3.2.1不同浓度I40OW作用72h后对细胞iNOS及MMP一9mRNA表达的影响又士s蜜别对照组0林mo盯L50林moFL100林moUL200林mo盯L400林mol/LiNOS0.248士0.0080.210士0.010#0.171士0.011*0.135士0.007*0.140士0.009*人扒护一91.05士0.021.36士0.03#0.91士0.03*0.40士0.03*0.62士0.05*注:，与对照组比较尸<0.05，#与对照组比较尸>0.05，各实验组之间比较尸<0.05
铡兰VN叱日HOdV口\︵6dl弓芝的O之叫iNOSMMP一9图3， 2.2200pmol/L1400W作用不同时间对CAL一27细胞iNOSmRNA、MMP一gmRNA表达的影响3.2.3各实验组、对照组CAL一27细胞经RT一PCR法扩增后表达水平经RT一PCR法扩增后各实验组、对照组可见 593bpGAPDH特异性扩增片段， 364bpiNOS特异性扩增片段、 172bpMMp一9特异性扩增片段见附录B图2。72h时，经不同浓度140OW处理的实验组细胞中iNOS及MMP一9的基因mRNA表达水平均随1400w浓度增加而逐渐下降。但24h、 50pm01/L组与对照组比较无统计学意义 (P>0.05)，实验组以72h，200pmOI/L抑制最为显著(P<0.05);以浓度为200“mol/L为例，经不同时间作用后各实验组细胞中iNOS及MM尸一9的mRNA表达水平均随 14O0w作用时间延长而逐渐下降，且两者的表达递减成明显相关性(P<0.05)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Notch1和表皮生长因子受体在舌鳞癌及癌前病变中的表达[J]. 黄红杰,平飞云,胡济安,赵士芳. 华西口腔医学杂志. 2009(06)
[2]iNOS抑制剂1400W对宫颈癌HeLa细胞株生长的抑制作用[J]. 叶君,孙红. 复旦学报(医学版). 2009(02)
[3]选择性iNOS抑制剂1400W对缺氧培养人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达的影响[J]. 邢宏松,黄长文,傅华群,马景胜,蔡成行. 实用临床医学. 2008(09)
[4]诱导型一氧化氮合酶在肿瘤组织中的作用[J]. 刘阳云,赵素萍. 国际检验医学杂志. 2008(05)
[5]一氧化氮与口腔黏膜癌前病变的相关性研究[J]. 方豪,张水龙,许励,曹之强,张梅. 医学研究杂志. 2007(04)
[6]Expressions of inducible nitric oxide synthase and matrix metalloproteinase-9 and their effects on angiogenesis and progression of hepatocellular carcinoma[J]. Min-Hua Sun, Xi-Chun Han, Ming-Ku Jia, Wei-Dong Jiang, Min Wang, Hong Zhang, Gang Han, Yi Jiang, Department of General Surgery, Second Hospital, Jilin University, Changchun 130041, Jilin Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(38)
[7]Increased oxidative DNA damage, inducible nitric oxide synthase, nuclear factor кB expression and enhanced antiapoptosis-related proteins in Helicobacter pylori-infected non-cardiac gastric adenocarcinoma[J]. Chi-Sen Chang Wei-Na Chen Hui-Hsuan Lin Cheng-Chung Wu Chau-Jong Wang Division of Gastroenterology,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of Gastroenterology,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of General Surgery,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaInstitute of Biochemistry,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaNational Young-Min Medical University,Taipei,Taiwan,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
[8]口腔鳞癌VEGF和NOS的表达及其相关性[J]. 李晓光,王延秀,王春,杨宪勇,王青,李毅,侯刚. 口腔医学研究. 2004(03)
[9]口腔鳞癌患者血清一氧化氮水平及其手术前后的变化[J]. 李卫星,张朝霞,张秀清,甘世新. 中国癌症杂志. 2003(01)
[10]5-氟脲嘧啶对恶性肿瘤患者血一氧化氮水平的影响[J]. 江素华,曾波航,李宇清,李丹. 实用癌症杂志. 2000(04)
本文编号：2898999
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