变形链球菌耐酸性相关基因的研究

发布时间：2020-12-12 16:26

　　目的寻找一个新的与变形链球菌耐酸性相关的基因方法含转座因子 Tn917的温度敏感型质粒 pTV1- OK 转化变形链球菌野生株 UA159,诱导转座因子 Tn917发生转座,从大量的发生转座的转座株库中筛选在 pH5．0的固体培养基上不能生长的突变株,即为耐酸性缺陷株。以含部分 Tn917的片段的 DIG 标记探针和 EcoR Ⅰ消化的变形链球菌 UA159和耐酸性缺陷株基因组进行 Southern 杂交,以证实耐酸性缺隐株的基因组中 Tn917插入的位点数。对比二者在不同 pH 值的固体培养基的生长情况及在不同 pH 值的液体培养基中的生长曲线；对比二者的糖酵解降低曲线及糖酵解最低 pH 值；对比二者的 ATPase 活性；对比二者的致死性 pH 值。不对称 PCR 法获得 Tng17插入位点上下游的基因,将 PCR 产物纯化、回收并与 pMD18—T 载体连接,转化大肠杆菌 DH5a,挑取多个克隆,增菌,提取质粒 DNA,测序。利用 Sequencher 软件分析测结果。以所得序列为关键词到 www．ncbi．nlm．nih 中已知的变形链球菌 UA159的基因组中进行 BLAST... 

【文章来源】：FDI世界口腔医学大会论文摘要汇编中华口腔医学会会议论文集

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本文编号：2912907