富血小板纤维蛋白对牙周膜前体细胞成骨分化的影响及机制研究
发布时间：2020-12-14 06:18
口腔多个临床学科均面临着牙槽骨骨量不足的问题。牙周病、创伤和肿瘤等因素导致的牙槽骨缺损，严重降低了患者的咀嚼功能，削弱了美观效果，也使临床修复工作的难度陡增。因此只有彻底解决骨量不足的问题，才能最终提高患者的生活质量。目前，临床常用的骨修复材料多为替代性成骨，而非真正的再生骨，很难完全满足临床修复及患者的需求。近年来的研究显示，应用组织工程手段，可以逐步实现牙槽骨的再生重建。牙周膜前体细胞（Periodontal Ligament Progenitor Cells，PDLPCs）为牙周来源的表达间充质干细胞表面抗原CD44、CD146、STRO-1等的专能成体干细胞，具有牙周组织分化特异性，是牙周组织即牙周膜、牙骨质和牙槽骨损伤后自我修复的原料细胞，且较容易分离获得。理想的种子细胞仍需要理想的细胞支架。再生医学的核心是用载体模拟特殊的组织微环境，使种子细胞和载体形成类似活体组织的整体。目前的研究倾向于使用自体材料作为细胞支架，而富血小板纤维蛋白（Platelet-Rich Fibrin，PRF）因其绝对的自体源性而成为了理想的自体细胞支架材料之一。为了验证PRF是否为理想的PDLPCs...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
PDLPCs的形态及生长曲线
图 2.2 表面抗原的识别鉴定Fig.2.2 Identificiation of surface markersA. PI 染料作为活细胞标志； B. MSC 表面标志表达情况A. PI was used as alive cells marker; B. The exression of MSC surface markers2.3.3 PDLPCs 的成骨诱导分化（1）ALP 活性：成骨诱导条件下，3天时，可见诱导组和非诱导组均无显著的 ALP 表达。7天时，成骨诱导组细胞的 ALP 表达显著增强，对照组 ALP 水平未见明显变化，与第 3天水平无显著性差别。14 天时，PDLPCs 的诱导组与 3 天及 7 天组相比较，ALP 表达水平均显著增强。此时，对照组即未经成骨诱导组，ALP 亦有微弱表达（图 2.3A）。在第 14天，诱导组的 ALP 水平与 3 天和 7 天时相比，达到最高，诱导组亦显著高于非诱导组约 15倍（P<0.001）（图 2.3B）。
图 2.3 不同培养条件下 ALP 活性Fig.2.3 ALP activity in different conditionsA. PDLPCs 在不同时间点诱导条件和非诱导条件下 ALP 的表达水平；B. 柱状图表示 PDLPCs同时间点诱导条件和非诱导条件下 ALP 的表达水平A. ALP level of PDLPCs at different time points; B. ALP level at different time points in difconditions（2）基质矿化：经过 21天培养，成骨诱导分化组的 PDLPCs的培养中可见钙结节形成，茜素红 S可见弥漫性红染，即钙化结节较均匀分布于细胞外基质中，基质矿化程度高（图2.4B）照组即无诱导组，茜素红S染色无着色，即无显著钙结节形成，无基质矿化（图2.4A）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Platelet-rich fibrin-induced bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into osteoblast-like cells and neural cells[J]. Qi Li1,Yajun Geng2,Lei Lu3,Tingting Yang1,Mingrui Zhang1,Yanmin Zhou11Implant Center,Stomatology Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China2Department of General Surgery,First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China 3Department of Neurology,Harrison International Peace Hospital,Hengshui 053000,Hebei Province,China. Neural Regeneration Research. 2011(31)
[2]富血小板纤维蛋白修复兔颅骨骨缺损的实验研究[J]. 李琦,周延民,翟静捷,王宇,张明锐. 口腔医学研究. 2011(07)
[3]人牙周膜干细胞矿化诱导分化的实验研究[J]. 高秦,刘宏伟,金岩,聂鑫,刘源. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2007(04)
[4]人牙周膜干细胞的体外分离、纯化及初步鉴定[J]. 高秦,刘宏伟,金岩,聂鑫,刘源. 实用口腔医学杂志. 2006(01)
本文编号：2915973
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
PDLPCs的形态及生长曲线
图 2.2 表面抗原的识别鉴定Fig.2.2 Identificiation of surface markersA. PI 染料作为活细胞标志； B. MSC 表面标志表达情况A. PI was used as alive cells marker; B. The exression of MSC surface markers2.3.3 PDLPCs 的成骨诱导分化（1）ALP 活性：成骨诱导条件下，3天时，可见诱导组和非诱导组均无显著的 ALP 表达。7天时，成骨诱导组细胞的 ALP 表达显著增强，对照组 ALP 水平未见明显变化，与第 3天水平无显著性差别。14 天时，PDLPCs 的诱导组与 3 天及 7 天组相比较，ALP 表达水平均显著增强。此时，对照组即未经成骨诱导组，ALP 亦有微弱表达（图 2.3A）。在第 14天，诱导组的 ALP 水平与 3 天和 7 天时相比，达到最高，诱导组亦显著高于非诱导组约 15倍（P<0.001）（图 2.3B）。
图 2.3 不同培养条件下 ALP 活性Fig.2.3 ALP activity in different conditionsA. PDLPCs 在不同时间点诱导条件和非诱导条件下 ALP 的表达水平；B. 柱状图表示 PDLPCs同时间点诱导条件和非诱导条件下 ALP 的表达水平A. ALP level of PDLPCs at different time points; B. ALP level at different time points in difconditions（2）基质矿化：经过 21天培养，成骨诱导分化组的 PDLPCs的培养中可见钙结节形成，茜素红 S可见弥漫性红染，即钙化结节较均匀分布于细胞外基质中，基质矿化程度高（图2.4B）照组即无诱导组，茜素红S染色无着色，即无显著钙结节形成，无基质矿化（图2.4A）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Platelet-rich fibrin-induced bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into osteoblast-like cells and neural cells[J]. Qi Li1,Yajun Geng2,Lei Lu3,Tingting Yang1,Mingrui Zhang1,Yanmin Zhou11Implant Center,Stomatology Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China2Department of General Surgery,First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China 3Department of Neurology,Harrison International Peace Hospital,Hengshui 053000,Hebei Province,China. Neural Regeneration Research. 2011(31)
[2]富血小板纤维蛋白修复兔颅骨骨缺损的实验研究[J]. 李琦,周延民,翟静捷,王宇,张明锐. 口腔医学研究. 2011(07)
[3]人牙周膜干细胞矿化诱导分化的实验研究[J]. 高秦,刘宏伟,金岩,聂鑫,刘源. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2007(04)
[4]人牙周膜干细胞的体外分离、纯化及初步鉴定[J]. 高秦,刘宏伟,金岩,聂鑫,刘源. 实用口腔医学杂志. 2006(01)
本文编号：2915973
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