静压力对人牙周膜干细胞成骨分化的影响
发布时间：2020-12-28 01:05
目的:1、建立人牙周膜干细胞（hPDLSCs）重物静压力加载模型,探讨hPDLSCs体外培养的方法及力学加载方式;2、通过检测hPDLSCs受压后成骨相关标志物ALP、RUNX2和OCN表达的变化,探索静压力对hPDLSCs成骨分化的影响,进一步加深对正畸牙周组织改建内在机制的认识。方法:1、采用组织块培养法培养原代人牙周膜细胞（hPDLCs）,通过有限稀释法分离提纯hPDLSCs,为后续实验提供实验细胞。2、通过形态学观察、细胞克隆形成实验、流式细胞术细胞表型鉴定、流式细胞术细胞周期分析、免疫荧光染色、成骨诱导实验和成脂诱导实验等方式对细胞来源进行鉴定。3、采用不同的静压力（1、2、3g/cm#）对培养的hPDLSCs作用不同的时间（12、24、72h）,并设立各力值各时间点的空白对照组,分别采用RT-qPCR法和Western blot检测ALP、RUNX2和OCN的mRNA和蛋白表达情况。结果:1、体外成功培养hPDLCs,并成功分离提纯hPDLSCs,取4-6代性状稳定的hPDLSCs用于后续实验。2、细胞克隆形成实验表明所培养的细胞具有较高的克隆形成率（...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牙周膜细胞和牙周膜干细胞的培养
图 1-2 第 3 代 hPDLSCs 生长曲线图Fig1-2 The growth curve of the 3 passage hPDLSC能力的检测胞连续培养 10d 后，倒置显微镜下观旋涡状分布。14d 后细胞克隆团逐渐增晶紫染色后细胞克隆团形成肉眼可见的数细胞数大于 50 的克隆细胞团数，率为 18%。1 2 3 5 70.00.5time(d)Opti
24C CD34 表达率图 1-4 hPDLSCs 流式细胞术鉴定4 The identification of hPDLSCs by flow cy荧光染色察可见，经波形丝蛋白染色后，光，表明 hPDLSCs 呈抗波形丝DLSCs 细胞核呈蓝色荧光，而胞白阴性（图 1-5 B）。提示实验所无外胚层来源的污染。
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38 MAPK通路调控BMP9诱导hPDLSCs成骨分化的体外研究[J]. 张奕,胡婷,叶国,向学熔,胡娜. 上海口腔医学. 2018(06)
[2]1,25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化[J]. 刘文静,孙养鹏,郑有华,张志光. 中国组织工程研究. 2018(09)
[3]机械振动防治骨质疏松症的研究进展[J]. 洪志楠,魏秋实,周广全,何伟. 中国骨质疏松杂志. 2017(09)
[4]胰岛素样生长因子1（IGF-1）促进人牙周膜干细胞增殖并诱导其向牙周膜成纤维细胞分化[J]. 屈俊秀,贾立辉,车彩昕,岳媛媛,朱江娜,刘超. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(04)
[5]牙周膜干细胞在正畸牙移动中的作用及机制研究[J]. 何奕德,马小杰,张立强,刘文佳. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2016(07)
[6]Characterization of the osteogenic potential of mesenchymal stem cells from human periodontal ligament based on cell surface markers[J]. Ruth Alvarez,Hye-Lim Lee,Cun-Yu Wang,Christine Hong. International Journal of Oral Science. 2015(04)
[7]静态压力对人牙周膜干细胞凋亡相关蛋白表达的影响[J]. 申琳,刘文佳,杨振华,马小杰,李彦浇,金钫. 现代生物医学进展. 2015(12)
[8]静压力对人牙周膜干细胞骨向分化能力的影响[J]. 马小杰,刘文佳,杨振华,申琳,李彦浇,金钫. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2015(03)
[9]p38丝裂原活化蛋白激酶在炎症微环境作用下对牙周膜干细胞成骨分化的影响[J]. 聂嘉,张博,顾斌,刘娜. 中国医学科学院学报. 2015(01)
[10]Runx2基因对骨代谢调控的研究进展[J]. 唐欢,许海甲,侯煜东,方卫军,李章华. 中国骨质疏松杂志. 2014(12)
本文编号：2942841
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牙周膜细胞和牙周膜干细胞的培养
图 1-2 第 3 代 hPDLSCs 生长曲线图Fig1-2 The growth curve of the 3 passage hPDLSC能力的检测胞连续培养 10d 后，倒置显微镜下观旋涡状分布。14d 后细胞克隆团逐渐增晶紫染色后细胞克隆团形成肉眼可见的数细胞数大于 50 的克隆细胞团数，率为 18%。1 2 3 5 70.00.5time(d)Opti
24C CD34 表达率图 1-4 hPDLSCs 流式细胞术鉴定4 The identification of hPDLSCs by flow cy荧光染色察可见，经波形丝蛋白染色后，光，表明 hPDLSCs 呈抗波形丝DLSCs 细胞核呈蓝色荧光，而胞白阴性（图 1-5 B）。提示实验所无外胚层来源的污染。
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38 MAPK通路调控BMP9诱导hPDLSCs成骨分化的体外研究[J]. 张奕,胡婷,叶国,向学熔,胡娜. 上海口腔医学. 2018(06)
[2]1,25-二羟维生素D3和地塞米松促进人颞下颌关节滑液间充质干细胞的体外成骨分化[J]. 刘文静,孙养鹏,郑有华,张志光. 中国组织工程研究. 2018(09)
[3]机械振动防治骨质疏松症的研究进展[J]. 洪志楠,魏秋实,周广全,何伟. 中国骨质疏松杂志. 2017(09)
[4]胰岛素样生长因子1（IGF-1）促进人牙周膜干细胞增殖并诱导其向牙周膜成纤维细胞分化[J]. 屈俊秀,贾立辉,车彩昕,岳媛媛,朱江娜,刘超. 细胞与分子免疫学杂志. 2017(04)
[5]牙周膜干细胞在正畸牙移动中的作用及机制研究[J]. 何奕德,马小杰,张立强,刘文佳. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2016(07)
[6]Characterization of the osteogenic potential of mesenchymal stem cells from human periodontal ligament based on cell surface markers[J]. Ruth Alvarez,Hye-Lim Lee,Cun-Yu Wang,Christine Hong. International Journal of Oral Science. 2015(04)
[7]静态压力对人牙周膜干细胞凋亡相关蛋白表达的影响[J]. 申琳,刘文佳,杨振华,马小杰,李彦浇,金钫. 现代生物医学进展. 2015(12)
[8]静压力对人牙周膜干细胞骨向分化能力的影响[J]. 马小杰,刘文佳,杨振华,申琳,李彦浇,金钫. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2015(03)
[9]p38丝裂原活化蛋白激酶在炎症微环境作用下对牙周膜干细胞成骨分化的影响[J]. 聂嘉,张博,顾斌,刘娜. 中国医学科学院学报. 2015(01)
[10]Runx2基因对骨代谢调控的研究进展[J]. 唐欢,许海甲,侯煜东,方卫军,李章华. 中国骨质疏松杂志. 2014(12)
本文编号：2942841
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