KDM6A在牙周膜干细胞成软骨向分化中的作用及机制研究

发布时间：2020-12-29 14:33

　　研究目的:临床上以骨关节病（osteoarthritis,OA）为代表的软骨缺损疾病较为常见,严重降低患者的生活质量。由于软骨基质中缺乏神经、血管而不能完全再生,因此在软骨缺损修复中,干细胞引导的组织再生引起越来越多的关注。牙周膜干细胞（Periodontal ligament stem cells,PDLSCs）具有多向分化潜能,且较脐带沃顿间充质干细胞（WJCMSCs）与骨髓间充质干细胞（BMMSCs）相比具有更高的多向分化潜能。同时其来源广泛,不涉及伦理问题,可作为理想的种子细胞,但牙周膜干细胞分化机制尚不明确,限制了其在组织再生中的应用。在干细胞分化过程中,表观遗传学调控起到重要作用。KDM6A是主要的H3K27去甲基化酶,有研究证实,KDM6A与干细胞多向分化有关,KDM6A能促进间充质干细胞（MSCs）成骨分化,抑制其成脂分化,然而,KDM6A在干细胞成软骨分化中作用尚不明确。本课题旨在研究KDM6A对PDLSCs成软骨分化的影响,并探究其对软骨再生影响的机制,为牙源性干细胞介导的软骨组织再生奠定基础,促进牙源性干细胞在组织再生中的临床转化。研究内容:本课题探讨了KDM6A... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PDLSCs成骨、成软骨和成脂向分化潜能检测

细胞凋亡并无明显差异；PDLSCs-WT 成软骨分化培养组与正常培养组相比，细胞凋亡亦无明显差异（图2D）。图 2 敲低 KDM6A 后 PDLSCs 细胞增殖活性和凋亡检测。（A）：RT-PCR 结果表明与 PDLSC-WT 相比，PDLD-KDM6Ash 中 KDM6A 敲低效率。 （B）细胞

20图 3 敲低 KDM6A 后 PDLSCs 成软骨发生分化潜能检测。 用成软骨诱导基培养 PDLSCs 一段时间。（A）：单层培养细胞成软骨诱导分化 2 周后，用阿辛蓝染液染色（a，b），微球培养细胞成软骨诱导分化 3 周后用阿辛蓝染和天狼猩红染液（d）染色。 比例尺=100 μm。 （B）：单层培养细胞成软导分化 2 周时蛋白多糖合成的定量检测。 （C）：蛋白质印迹法检测 PDLS组和 PDLSC-KDM6Ash 组 SOX9 表达量，以 β-actin 为内参，结果显示 SO白质表达量降低。 （D）：成软骨诱导分化 3 周内，RT-PCR 检测 PDLSC组和 PDLSCs-KDM6Ash 组细胞中成软骨标志基因，SOX9、Col2a1 和 ACA表达，以 β-actin 为内参。计量资料采用单因素方差分析，所有的误差线代表（n = 3）。 * P <0.05， ** P <0.01。

【参考文献】：
期刊论文
[1]组织工程修复髁突软骨-骨复合体缺损研究进展[J]. 王飞宇,何冬梅,杨秀娟.  中国实用口腔科杂志. 2016(03)
[2]我国颞下颌关节病的研究与临床进展[J]. 刘洪臣.  中华口腔医学杂志. 2014 (07)

博士论文
[1]SOX9基因修饰骨髓间充质干细胞修复关节软骨损伤[D]. 杨自权.华中科技大学 2008



本文编号：2945803