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IL-1β干预下TRAF6在牙周膜成纤维细胞中表达的研究

发布时间:2021-01-24 17:41
  【目的】:原代培养人牙周膜成纤维细胞,建立人牙周膜成纤维细胞的体外模型;观察在不同浓度组的IL-1β干预下,肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在人牙周膜成纤维细胞中的表达状况,为细胞因子网络对细胞功能的调控提供新资料。【方法】:利用组织块培养法对人牙周膜成纤维细胞进行体外分离培养,并对其进行形态学及免疫组织化学鉴定。选取5~8代生长稳定的人牙周膜成纤维细胞,分别以0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β对细胞进行干预,采用逆转录多聚酶链反应法及免疫组织化学方法检测TRAF6在细胞中的表达状况,利用计算机图像分析系统对检测结果进行图像及数据的采集,并对实验数据采用单因素方差分析法进行统计分析,观察TRAF6在不同浓度的IL-1β干预下在细胞中的定位及表达特点。【结果】:(1)人牙周膜成纤维细胞培养并传代成功,5代后细胞生长稳定,倒置显微镜下观察,细胞为星形或长梭形,为典型的成纤维样细胞形态;免疫组织化学染色观察,细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,符合人牙周膜成纤维细胞的生物学特性。(2)RT-PCR及免疫组化... 

【文章来源】:山西医科大学山西省

【文章页数】:47 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

IL-1β干预下TRAF6在牙周膜成纤维细胞中表达的研究


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免疫组织化学染色,波形丝蛋白,细胞,成纤维样细胞


山西医科大学硕上学位论文.‘,‘J万..民竹几、,’;.雄、、图7图8图3:HPLFS以组织块为中心呈束状生长 x100;图4:传代后,HPLFs散在生长x50;图5:波形蛋自免疫组织化学染色阳性 x100;图6:波形丝蛋白免疫组织化学染色阳性,表现为胞浆阳性表达的颗粒x400;图7:复苏后的细胞旱成纤维样细胞形态xl00;图8:复苏后的细胞波形丝蛋自免疫组织化学染色阳性 x100。 Figure3:theHPLFsgrowaseenteroftissueblockX100:Figure4:AfterPassage, HpLFsseatteredgrowth X50;Figures:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistoehemiealmethodXl00: Figure6:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethod,Positive PerformaneeineytoPlasmicX400:Figure7:Reeoveryeellswerefibroblast一 likeeellsform.X100;Figures: Afterthereeovery, eellsshowPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethodX100.4细胞生长曲线的绘定:图 6:HPLFS的细胞生长曲线 Figure6:ThegrowthcurveofHPLFsHPLFs生长曲线‘‘一一--山~~~~今今丫丫才 -...厂厂 厂 ///// ///// /////~~~一\冷/一 /// lll{l{11118︻了‘︵匕匀一 43Q自 O0C01曰 00000划QO2O 4O6O80100120140时间(h)5细胞的冻存与复苏:复苏后的细胞24h内贴壁延展并开始生长,生长状态稳定

【参考文献】:
期刊论文
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[4]牙周组织工程研究进展[J]. 陈发明,吴织芬,金岩.  中华口腔医学杂志. 2004(06)
[5]酶消化组织块法原代培养人牙周膜成纤维细胞的初步研究[J]. 汤楚华,施生根,牛忠英,党平,郑燕华,史亮.  中华医学杂志. 2004(08)
[6]原代人牙周膜成纤维细胞的培养及培养方法的改进[J]. 张明珠,雷雅燕,刘晓,朱红,欧炯光.  昆明医学院学报. 2004(01)
[7]IL-1β对人牙周膜成纤维细胞的增殖和碱性磷酸酶活性的影响[J]. 隋晓梅,王健平.  口腔医学研究. 2003(05)
[8]人牙周膜成纤维细胞原代培养的研究[J]. 胡军,陈新民,麻健丰.  现代口腔医学杂志. 2002(02)
[9]IL-1β在成人牙周炎患者牙龈组织中表达[J]. 尹丽媛,刘纯义,何安光.  解剖科学进展. 2002(01)
[10]白介素1信号转导研究进展[J]. 郭甫坤,吴曙光.  国外医学(分子生物学分册). 2001(01)



本文编号:2997659

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