张应力诱导大鼠颅骨缝间充质干细胞早期成骨分化过程中ROCK-TAZ信号轴的调控作用

发布时间：2021-02-19 02:25

　　目的:探讨机械张应力作用下大鼠颅骨缝间充质干细胞早期成骨分化中ROCK-TAZ信号轴的调控作用。方法:提取大鼠颅骨缝间充质干细胞并通过流式细胞仪鉴定细胞表面标记物。培养大鼠颅骨缝间充质干细胞并进行成骨成脂诱导分化,使用茜素红、油红O染色及Real-time PCR检测其成骨成脂分化能力。通过Flexcell-5000应力加载系统对大鼠颅骨缝间充质干细胞施加5%,0.5HZ,2h/天的张应力刺激,使用鬼笔环肽骨架染色观察细胞形态,以及通过细胞计数检测细胞增殖能力,通过Real-time PCR及WesternBlot检测成骨相关指标OPN、Runx2表达情况。对细胞不同时间点连续加力,通过Real-time PCR及WesternBlot检测ROCK以及胞核蛋白TAZ表达情况,使用ROCK抑制剂Y27632抑制ROCK活性后,观察张应力对间充质干细胞成骨能力以及胞核蛋白TAZ的影响。通过双荧光素酶报告基因验证大鼠TAZ基因与Runx2存在结合位点,同时构建TAZ慢病毒载体下调TAZ表达,观察张应力作用下Runx2表达的变化。结果:细胞流式及成骨成脂诱导结果显示大鼠颅骨缝间充质干细胞具有干... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：100 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 大鼠颅骨缝间充质干细胞分离与鉴定
    1 材料
    2 方法
    3 结果
    4 讨论
第二部分 张应力作用对大鼠颅骨缝间充质干细胞早期增殖分化的影响
    1 材料
    2 方法
    3 结果
    4 讨论
第三部分 张应力作用下ROCK-TAZ信号轴对大鼠颅骨缝间充质干细胞成骨分化的调控作用
    1 材料
    2 方法
    3 结果
    4 讨论
全文总结
参考文献
综述
    参考文献
附录：临床病例展示
论文发表情况
致谢



本文编号：3040463