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骨膜蛋白在小鼠骨髓间充质细胞牵张成骨中的表达及作用

发布时间:2021-03-05 12:57
  研究背景牵张成骨作为一项热门的内源性骨组织工程学,其生物学机制仍未被研究清楚。骨髓间充质细胞在牵张成骨过程中起着重要作用,是对应力最为敏感的应答细胞之一。目前尚未有骨膜蛋白在牵张成骨分化过程中表达及作用的研究报道。本研究拟分离并培养出小鼠骨髓间充质细胞,应用多单元细胞拉伸装置对其施加动态、大小不同的长轴形变量来刺激诱导成骨分化,检测该过程中成骨信号及骨膜蛋白的表达水平,并进一步给与外源性骨膜蛋白干预,探讨骨膜蛋白在小鼠骨髓间充质细胞牵张成骨分化过程中的作用。材料与方法1.小鼠骨髓间充质细胞的分离、培养及鉴定利用密度梯度离心法分离并培养小鼠骨髓间充质细胞,并根据细胞形态学、细胞分化后产生矿化结节及Ⅱ型胶原等对小鼠骨髓间充质细胞分化能力进行鉴定。2.骨膜蛋白在小鼠骨髓间充质细胞的牵张成骨分化过程中的表达应用多单元细胞拉伸装置,检测在5%(A组)、10%(B组)、15%(C组)形变量的动态牵张力作用下,小鼠骨髓间充质细胞中成骨信号及骨膜蛋白的表达水平。3.骨膜蛋白在小鼠骨髓间充质细胞的牵张成骨分化过程中的作用应用多单元细胞拉伸装置,使用15%形变量的牵张力,在0g/L(A组)、10g/L(B... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:126 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

骨膜蛋白在小鼠骨髓间充质细胞牵张成骨中的表达及作用


图1-3?II型胶原(x400)??Fig.?1-3?Type?II?collagen?(><400)??

茜素,矿化,结节,骨髓


?颂士学位论文???一?n?■,??老.?十?矯??图1-2矿化结节(茜素红X200)??Fig.?1-2?The?mineralized?nodules?(Alizarin?redx200)??魏轟_?▲、??M?''?J?ik??图1-3?II型胶原(x400)??Fig.?1-3?Type?II?collagen?(><400)??3.讨论??骨髓间充质细胞在骨形成中扮演着重要角色,是牵张成骨中M重要感受牵??张力刺激和成骨分化的细胞,由十典优良的成骨潜力和丰富的来源,一直是研??宄的焦点,是-种理想的组织工程的种f?细胞151-5()|。临床上经常取小鼠的的肢体??长背的付髓来分离并培养骨髓间充质细胞,但由于小鼠中可获得的骨髓量较少,??15??

多通道,细胞,硅胶,细胞培养


?颂士学位论文???1.2方法??1.2.1细胞加力??①在超净工作台上,将特制的硅胶膜在高温、高压灭菌消毒后自然晾干,??予以1.5?111丨(0.012|^/1111)的1型鼠尾胶在硅胶膜上涂抹均匀,待胶干后,将硅??胶膜组装到多单元细胞拉伸装置的细胞培养单元上,同时在硅胶膜上放置内环??长40mm、宽30mm的硅胶膜矩形环以控制细胞接种的范围在矩形环内。??②将细胞培养单元在37°C体积分数5%C〇2培养箱培养24h后取出硅胶膜??矩形环,补加含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基10mL。??③在细胞加力前在倒置显微镜观察小鼠BMSCs细胞在硅胶膜上的生长及??贴附情况,并收集样本进行检测。??1????-—Bill??fe;爛:、-二i??Us巍:??图2-1多通道单轴细胞牵拉装置??Fig.?2-1?The?multichannel?uniaxial?cell?traction?device??④将细胞培养单元分为A组,B组,C组,将细胞培养单元安装于多单元??细胞拉伸装置,通过多通道细胞牵拉装置(图2-1)的培养箱中信次施加5%?(A??19??

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本文编号:3065240

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