LncRNA-01126通过MEK/ERK信号通路抑制hPDLCs的迁移
发布时间:2021-03-07 18:39
目的慢性牙周炎是危害牙周支持组织的慢性感染性炎症,能引起牙槽骨丢失,甚至导致牙齿脱落。越来越多的研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是牙周炎发生发展过程中的重要调控分子。本研究旨在探讨lncRNA-01126在牙周炎过程中的生物学作用和机制。方法1.通过lncRNA表达谱芯片筛选牙周炎患者与健康人牙龈组织中差异表达的lncRNA,并用Q-PCR技术验证。采用结扎法建立牙周炎小鼠模型及P.g处理牙周膜细胞后,进一步验证lncRNA-01126的表达。2.在牙周膜细胞中分别过表达和敲低lncRNA-01126后研究lncRNA-01126对牙周膜细胞的生物学的影响。通过CCK8实验检测lncRNA-01126对牙周膜细胞增殖能力的影响、应用细胞划痕实验和Transwell实验检测lncRNA-01126对牙周膜细胞迁移能力的影响、以及应用流式细胞术检测lncRNA-01126对牙周膜细胞凋亡能力的影响。3.采用蛋白质印迹(Western Blot,WB)技术检测lncRNA-01126参与调控的相关信号通路,并用信号通路抑制剂进一步验证其功...
【文章来源】:重庆医科大学重庆市
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
lncRNA芯片中的差异基因A:牙周炎与正常牙龈组织中差异表达的基因;B:Q-PCR验证lncRNA-01126、lncRNA-545726、lncRNA-KLLPlncRNA-FIFH
重庆医科大学硕士研究生学位论文18图2小鼠牙周炎模型验证lncRNA-01126表达A:Micro-CT分析小鼠牙槽骨丢失;B:小鼠牙周炎模型牙龈组织lncRNA-01126表达;C:小鼠牙周炎模型牙龈组织相关炎症因子表达Figure2.ToverifytheexpressionoflncRNA-01126inmousemodelofperiodontitis.(A)AnalysisofthelossofalveolarboneinmicebyMicro-CT.(B)ExpressionoflncRNA-01126ingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.(C)Expressionsofrelatedinflammationfactorsingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.3.3LPS-PG促进hPDLCslncRNA-01126表达增加我们采用酶消化法提取正畸牙中的hPDLCs,经细胞形态及免疫荧光染色鉴定hPDLCs表型。提取的hPDLCs形态呈长梭形(图3A),表达Vimentin,不表达Keratin(图3B)。1μg/mlLPS-PG分别刺激hPDLCs24h,48h,72h后,Q-PCR检测lncRNA-01126的表达明显增高。综上,通过体内实验和体外实验均发现lncRNA-01126在牙周炎过程中表达显著增高,与lncRNA芯片结果一致。
重庆医科大学硕士研究生学位论文19图3hPDLCS的鉴定及lncRNA-01126在hPDLCS中的表达A:hPDLCS的形态学特征;B:hPDLCS的免疫荧光染色;C:LPS-PG感染hPDLCS后lncRNA-01126的表达Figure3.IdentificationofhPDLCsandexpressionoflncRNA-01126inhPDLCs.(A)MorphologyofhPDLCs.(B)ImmunofluorescencestainingofhPDLCs.(C)TheexpressionoflncRNA-01126ofLPS-PGinfectedwithhPDLCs.4讨论牙周炎是一种慢性炎症,在牙周炎早期主要临床表现可能仅仅是牙龈的红肿及炎症反应,但一旦忽视牙周炎,其可能发展至牙槽骨骨质丢失,牙齿松动甚至脱落。牙周炎的传统治疗方法包括手术治疗和非手术治疗。尽管牙周治疗的整体
【参考文献】:
期刊论文
[1]骨细胞研究的最新进展[J]. 王刚,陆超锋,李敏,应航,童培建. 中国骨伤. 2016(01)
[2]Hedgehog信号通路与骨质疏松症[J]. 罗明,黄宏兴,黄红,李泽钿,赖圆圆. 中国骨伤. 2014(02)
[3]长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展[J]. 何冬梅,吴红,高杨军,胡小毛. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2012(02)
本文编号:3069609
【文章来源】:重庆医科大学重庆市
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
lncRNA芯片中的差异基因A:牙周炎与正常牙龈组织中差异表达的基因;B:Q-PCR验证lncRNA-01126、lncRNA-545726、lncRNA-KLLPlncRNA-FIFH
重庆医科大学硕士研究生学位论文18图2小鼠牙周炎模型验证lncRNA-01126表达A:Micro-CT分析小鼠牙槽骨丢失;B:小鼠牙周炎模型牙龈组织lncRNA-01126表达;C:小鼠牙周炎模型牙龈组织相关炎症因子表达Figure2.ToverifytheexpressionoflncRNA-01126inmousemodelofperiodontitis.(A)AnalysisofthelossofalveolarboneinmicebyMicro-CT.(B)ExpressionoflncRNA-01126ingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.(C)Expressionsofrelatedinflammationfactorsingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.3.3LPS-PG促进hPDLCslncRNA-01126表达增加我们采用酶消化法提取正畸牙中的hPDLCs,经细胞形态及免疫荧光染色鉴定hPDLCs表型。提取的hPDLCs形态呈长梭形(图3A),表达Vimentin,不表达Keratin(图3B)。1μg/mlLPS-PG分别刺激hPDLCs24h,48h,72h后,Q-PCR检测lncRNA-01126的表达明显增高。综上,通过体内实验和体外实验均发现lncRNA-01126在牙周炎过程中表达显著增高,与lncRNA芯片结果一致。
重庆医科大学硕士研究生学位论文19图3hPDLCS的鉴定及lncRNA-01126在hPDLCS中的表达A:hPDLCS的形态学特征;B:hPDLCS的免疫荧光染色;C:LPS-PG感染hPDLCS后lncRNA-01126的表达Figure3.IdentificationofhPDLCsandexpressionoflncRNA-01126inhPDLCs.(A)MorphologyofhPDLCs.(B)ImmunofluorescencestainingofhPDLCs.(C)TheexpressionoflncRNA-01126ofLPS-PGinfectedwithhPDLCs.4讨论牙周炎是一种慢性炎症,在牙周炎早期主要临床表现可能仅仅是牙龈的红肿及炎症反应,但一旦忽视牙周炎,其可能发展至牙槽骨骨质丢失,牙齿松动甚至脱落。牙周炎的传统治疗方法包括手术治疗和非手术治疗。尽管牙周治疗的整体
【参考文献】:
期刊论文
[1]骨细胞研究的最新进展[J]. 王刚,陆超锋,李敏,应航,童培建. 中国骨伤. 2016(01)
[2]Hedgehog信号通路与骨质疏松症[J]. 罗明,黄宏兴,黄红,李泽钿,赖圆圆. 中国骨伤. 2014(02)
[3]长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展[J]. 何冬梅,吴红,高杨军,胡小毛. 暨南大学学报(自然科学与医学版). 2012(02)
本文编号:3069609
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