果蝇裸露角蛋白2在大鼠牙本质发育过程中的表达

发布时间：2021-03-17 22:36

　　目的明确果蝇裸露角蛋白2（Nkd2）在大鼠下颌第一磨牙牙本质发育过程中表达。方法取出生后1d、3d、5d、7d、9d的SD乳鼠下颌骨制作石蜡切片免疫组化染色,倒置显微镜观测Nkd2在大鼠牙胚中的表达;体外培养大鼠牙乳头细胞并采用细胞免疫组化染色进行组织来源鉴定,诱导其成牙本质向分化后茜素红染色,荧光定量RT-qPCR和Western blot检测Nkd2在此过程中的表达变化趋势。结果免疫组织化学染色显示Nkd2在牙乳头、成牙本质细胞层和成釉细胞和牙囊中均阳性,在牙本质形成早期的成牙本质细胞层中强表达,随后减弱。Nkd2在大鼠牙乳头细胞中的表达呈阳性,矿化诱导4周后茜素红染色显示有矿化结节形成。荧光定量RT-qPCR和Western blot检测显示矿化诱导培养过程中Nkd2的表达呈先上调后下调趋势。结论 Nkd2在大鼠牙胚组织中的表达分布具有时空特异性,体外大鼠牙乳头细胞诱导成牙本质细胞向分化过程中,Nkd2表达呈先上调后下调的趋势,推测Nkd2可能在牙本质形成早期发挥作用。 

【文章来源】：现代口腔医学杂志. 2020,34(04)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

a出生后1-5天大鼠牙胚免疫组织化学染色

图1 a出生后1-5天大鼠牙胚免疫组织化学染色第三代大鼠牙乳头细胞（图1-2A）体外培养至80%联合进行免疫组化染色。细胞呈波形蛋白阳性（图2B）和角蛋白阴性（图2C），表明其组织来源为间充质，证明获得了纯化的大鼠牙乳头细胞。Nkd2在体外培养的P3代大鼠牙乳头细胞中呈弱阳性表达，主要分布于细胞质内（图2D）。

第三代大鼠牙乳头细胞（图1-2A）体外培养至80%联合进行免疫组化染色。细胞呈波形蛋白阳性（图2B）和角蛋白阴性（图2C），表明其组织来源为间充质，证明获得了纯化的大鼠牙乳头细胞。Nkd2在体外培养的P3代大鼠牙乳头细胞中呈弱阳性表达，主要分布于细胞质内（图2D）。体外培养的第三代大鼠牙乳头细胞生长至80%联合后矿化诱导液中连续培养4周，茜素红染色显示有矿化结节形成，表明牙乳头细胞已向成牙本质细胞方向分化（图3）。


本文编号：3087834