鞣花酸对变异链球菌的体外抑菌作用及机制研究

发布时间：2021-03-29 13:25

　　目的:研究鞣花酸对变异链球菌的体外抑菌作用及可能机制,为其防治龋病的应用提供实验依据。方法:以复方氯己定含漱液为阳性对照、5%二甲基亚砜（DMSO）溶液为阴性对照,采用打孔法抑菌试验测定抑菌圈直径考察50、25、12.5、6.25、3.125、1.562 5 mg/mL鞣花酸对变异链球菌的抑菌效果,并采用微量稀释法测定其对变异链球菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。以5%DMSO溶液为阴性对照,采用结晶紫染色法测定1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸对变异链球菌生物膜形成的影响,并在荧光染色后通过激光扫描共聚焦显微镜观察1/2MIC鞣花酸作用后生物膜的结构变化;分别采用苯酚硫酸法和还原型辅酶Ⅰ氧化法考察1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸对变异链球菌细胞外多糖（EPS）的抑制率和细胞外基质中乳酸脱氢酶（LDH）活力的影响。结果:12.5～50 mg/mL鞣花酸对变异链球菌产生了直径均大于15 mm的抑菌圈,50 mg/mL鞣花酸作用下抑菌圈直径与复方氯己定含漱液相当。鞣花酸对变异链球菌的MIC、MBC分别为12.5、25 mg/mL。... 

【文章来源】：中国药房. 2020,31(05)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

细菌生物膜存活率测定结果

染色结果显示，阴性对照组中细胞互相黏附聚集形成团块，主要呈绿色荧光，表示多为活菌，细菌生物膜结构完整。鞣花酸组中，多呈红色荧光，表明经1/2MIC鞣花酸干预后细胞多为死菌，生物膜结构被破坏。变异链球菌生物膜激光共聚焦扫描图见图2。3.5 细菌中EPS生成抑制率测定结果

图3 EPS的生成抑制率测定结果本研究通过打孔法抑菌圈试验测定抑菌圈直径，来初步判定鞣花酸对变异链球菌的抑制作用。结果显示，12.5～50 mg/mL鞣花酸对变异链球菌产生了抑菌圈，且抑菌圈直径>15 mm。研究中选用复方氯己定含漱液为阳性对照药，该药品中每500 mL中含葡萄糖酸氯己定0.6 g、甲硝唑0.1 g，为口腔常用的抑菌消炎药[19]。本研究选用微量稀释法测定了鞣花酸对变异链球菌的MIC，试验中以刃天青显色进行MIC的终点判定，最终得到了鞣花酸对变异链球菌的MIC、MBC分别为12.5、25 mg/mL，该方法比直接观察法更加客观、灵敏。另外，试验结果显示，3.125～25 mg/mL鞣花酸对变异链球菌的生物膜产生了抑制作用，且1/2MIC浓度的鞣花酸可破坏细菌生物膜结构。通过以上试验结果可知，鞣花酸不仅可以抑制浮游细菌的生长，还能抑制细菌生物膜的形成。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3107623