miR-204-5p靶向溴结构域蛋白4对舌鳞状细胞癌细胞SCC25增殖和迁移侵袭的影响研究

发布时间：2021-04-06 12:19

　　目的 探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白（BRD）4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR-204-5p转染SCC25细胞后,细胞计数试剂盒（CCK）8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测miR-204-5p对SCC25迁移和侵袭的影响;使用TargetScan和荧光素酶实验分析并验证miR-204-5p与BRD4的靶向调控关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-204-5p模拟物和抑制剂对BRD4表达水平的影响;Transwell小室法和CCK8法检测miR-204-5p调控BRD4对SCC25增殖和迁移侵袭的影响。结果 miR-204-5p在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达下调,BRD4在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达上调;提高miR-204-5p表达量抑制SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭;TargetScan和荧光素酶实验证实miR-20... 

【文章来源】：华西口腔医学杂志. 2020,38(02)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

图 1 RT-qPCR检测miR-204-5p和BRD4表达水平的变化

图 1 RT-qPCR检测miR-204-5p和BRD4表达水平的变化TargetScan软件在线分析发现BRD4和miR-204-5p存在结合位点,见图4A。与共转染miR-NC和BRD4-WT组(0.85±0.06)相比,共转染miR-204-5p和BRD4-WT组的细胞相对荧光活性(0.39±0.08)显著降低(t=7.967,P=0.001),见图4B。miR-NC、miR-204-5p、anti-miR-NC、anti-miR-204-5p组的BRD4 mRNA相对表达水平(图4C)分别为1.00±0.05、0.34±0.04、0.94±0.07、1.66±0.11;蛋白相对表达水平(图4D、E)分别为1.00±0.09、0.46±0.07、0.91±0.03、1.87±0.16。miR-204-5p模拟物促使BRD4的mRNA和蛋白均显著下调表达,miR-204-5p抑制剂促使BRD4的mRNA和蛋白表达水平显著上调,差异有统计学意义(FmRNA=165.668,PmRNA=0.000;F蛋白=105.539,P蛋白=0.000)。

miR-204-5p、miR-204-5p+pcDNA、miR-204-5p+BRD4组发生迁移的SCC25细胞数量分别为70.24±7.18、68.25±6.81、99.36±11.04(F=12.418,P=0.007);发生侵袭的细胞数量分别为50.17±5.14、48.95±4.92、81.39±8.56(F=24.559,P=0.001)。与miR-204-5p和miR-204-5p+pcDNA组相比,miR-204-5p+BRD4组的SCC25细胞增殖能力显著提升(P<0.05),见图5。图 4 荧光素酶报告实验

【参考文献】：
期刊论文
[1]溴结构域蛋白4在肿瘤中的研究进展[J]. 仝营营,丁文评,张莲,金星镜,陈思宇.  癌症进展. 2015(01)



本文编号：3121420