Tca8113阿霉素耐药细胞系建立与转移相关蛋白ADAM15表达的实验研究

发布时间：2021-04-19 03:31

　　研究目的:通过构建舌癌阿霉素耐药细胞系（Tca8113/ADM）,用蛋白印迹技术检测Tca8113/ADM及亲本细胞系Tca8113的去整合素-金属蛋白酶15（Adamalysin15,ADAM15）蛋白表达水平,并分析其与Tca8113耐药性的关系,从肿瘤耐药的角度对舌癌的耐药与肿瘤转移相关蛋白ADAM15的关系进行初步探讨。方法:1、用人的舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,采用药物浓度梯度递增法,阿霉素持续诱导,历时15个月,成功构建舌癌Tca8113/ADM细胞系。2、舌癌Tca8113亲本细胞系作为对照组,阿霉素耐药细胞系Tca811/ADM作为实验组。用Western Blotting技术检测Tca8113/ADM及Tca8113亲本细胞系的ADAM15蛋白表达水平,并分析其与舌癌Tca8113耐药性的关系。结果:1、采用药物浓度梯度递增法持续给药诱导,连续培养15个月后,舌癌Tca8113细胞能够在含1.2ug/mlADM的培养液稳定生长。此时其耐药指数约为22.61。光镜下Tca8113/ADM细胞比亲本细胞胞体较大、较圆,胞核不规则,细胞内的颗粒增多,倍增时间延长。2、T... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

舌癌Tca8113阿霉素耐药细胞及亲本细胞的生物学特性改变A：亲本Tca8113舌癌细胞生长呈典型的上皮样细胞生长方式，细胞间分界清楚，为“铺

2 Tca8113/ADM 舌癌耐药细胞针对阿霉素的 IC50以及耐药倍数（RI）的情况：Tca8113/ADM 舌癌耐药细胞 IC50为 90.01ug/ml，其亲本细胞的 IC50为3.982ug/ml；耐药倍数（RI）为 22.61。3 Western Blot检测结果：舌癌Tca8113亲本细胞系及Tca8113/ADM细胞系，其ADAM15蛋白的表达水平，用Westernblot法检测，在分子量约100KD处可见清晰条带，条带上方约115KD处可见一非特异性蛋白条带，欠清晰。Tca8113/ADM细胞表达量大，Tca8113细胞表达量较少。用ImageJ软件对扫描图进行图像分析，图 3 Tca8113 亲本与耐药舌癌细胞生长曲线Fig 3 The growth curve of Tca8113 parental cell line andTca8113/ADM cell line of tongue cancer

图4 ADAM15、内参GAPDH蛋白在不同组中的表达 expression of ADAM15 protein in differe与耐药细胞组ADAM15/GAPDH灰度平均值（x ± 灰度平均值 0.244±0.231 1.217±0.494灰度平均值是亲本细胞组的4.98倍，完全随机本细胞组灰度平均值差异有统计学意义。

【参考文献】：
期刊论文
[1]ADAM9、ADAM10基因沉默对腺样囊性癌高转移潜能细胞生物学行为的影响[J]. 刘秀明,蔡以理,徐骎,陈万涛.  中国口腔颌面外科杂志. 2009(03)
[2]乳腺癌细胞株MCF-7/ADM中肿瘤干细胞的研究[J]. 郭运杰,崔秀英,姚和瑞.  中国病理生理杂志. 2008(12)
[3]肺癌患者血清中解整合素-金属蛋白酶的表达及意义[J]. 邬勇坚,刘传文,陈飞鹏,阳隽.  广州医学院学报. 2008(03)
[4]人胃癌高低侵袭转移潜能细胞系对化疗药物敏感性的比较研究[J]. 全细云,朱建思,张亮,刘慧敏,周建国.  南华大学学报(医学版). 2008(03)
[5]恶性肿瘤转移机制研究新进展[J]. 左衍海,施鑫.  医学研究生学报. 2008(03)
[6]ADAMs在肿瘤发展中的作用及其机制研究进展[J]. 陈勤,蒙凌华,丁健.  中国癌症杂志. 2008(02)
[7]舌癌转移淋巴结中舌癌细胞耐药性的实验研究[J]. 邝晓聪,温冠媚,蔡捷,李俊,姚金光.  中华肿瘤防治杂志. 2007(21)
[8]乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist的表达与EMT现象的实验研究[J]. 张飞,史玉荣,张霖,张斌,魏熙胤,杨毅,席广民,牛瑞芳.  中国肿瘤临床. 2007(07)
[9]RGD类肽抑制高转移舌癌细胞粘附、迁移的实验研究[J]. 顾玲,杨连甲,董绍忠.  口腔颌面外科杂志. 2004(01)
[10]舌鳞状细胞癌颈部淋巴结转移的临床分析[J]. 康非吾,黄欣,吴正华,温玉明,王昌美.  口腔颌面外科杂志. 2003(01)



本文编号：3146744