二氧化钛纳米管负载米诺环素对成骨细胞和施万细胞生物学行为影响的实验研究

发布时间：2021-04-19 21:33

　　钛（Ti）金属被广泛应用于生物医学领域,其良好的机械性能和生物安全性为种植体提供了“骨整合”的基础,纳米结构的钛表面改性又进一步促进了种植体的“骨整合”。然而,与天然牙相比种植体周围缺乏牙周膜及其终末机械感受器,理论上缺乏与天然牙相似的感知能力,但有研究发现种植体和假肢患者均具有很好的肢体运动控制能力、本体感觉和神经反馈,并由此提出了“骨感知”理论。由于这种感知能力弱,患者易忽略过大咬合力的存在,造成过度载荷并引起种植体周围骨质吸收、颞下颌关节病甚至种植体的折断,最终导致种植失败。因此研究种植体植入后周围神经的再生具有重要的临床意义。通过自组装的方法在纯钛表面构建二氧化钛（TiO₂）纳米管管状结构能够获得较大的比表面积,其与骨组织的弹性模量较为接近且对成骨细胞的增殖及分化具有促进作用,利用TiO₂纳米管以上的两种性能,有望为种植体的“骨整合”和“骨感知”的研究提供新的思路和选择。此外,施万细胞在周围神经的修复和再生过程中发挥了重要的生物学作用,是周围神经系统中最为主要的胶质细胞。对施万细胞的增殖、迁移、分泌等相关生物学行为进行研究,对于种植体... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
绪论
2）纳米管的研究进展">    1、二氧化钛（TiO₂）纳米管的研究进展
2纳米管制备的研究进展">        1.1 TiO₂纳米管制备的研究进展
2纳米管对成骨的影响">        1.2 TiO₂纳米管对成骨的影响
2纳米管的载药性能研究">        1.3 TiO₂纳米管的载药性能研究
    2、种植体“骨感知”的研究进展
    3、周围神经再生的机制
    4、不同钛表面对施万细胞的影响
    5、
        5.1 营养神经的药物
        5.2 神经营养因子
        5.3 免疫抑制剂
        5.4 米诺环素
2纳米管的制备及表征">第一章 TiO₂纳米管的制备及表征
    1.1 材料
        1.1.1 主要试剂
        1.1.2 主要设备
        1.1.3 主要软件
    1.2 二氧化钛纳米管的制备
        1.2.1 钛片预处理
        1.2.2 阳极氧化法制备过程
2纳米管的表征">    1.3 TiO₂纳米管的表征
        1.3.1 体视显微镜（Stereoscopic Microscope,SM）分析
        1.3.2 扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope,SEM）分析
        1.3.3 X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）分析
        1.3.4 接触角及表面能分析
        1.3.5 统计分析
    1.4 实验结果
        1.4.1 体式显微镜结果
        1.4.2 扫描电子显微镜观察结果
        1.4.3 X射线衍射物象分析
        1.4.4 接触角观察结果
    1.5 讨论
    1.6 小结
2纳米管负载米诺环素的载药及缓释分析">第二章 TiO₂纳米管负载米诺环素的载药及缓释分析
    2.1 材料
        2.1.1 仪器和耗材
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要软件
    2.2 方法
        2.2.1 负载米诺环素溶液
        2.2.2 药物的体外释放
    2.3 结果
        2.3.1 载药率
        2.3.2 元素分析
        2.3.3 米诺环素的体外释放
    2.4 讨论
    2.5 小结
2纳米管载米诺环素对成骨细胞活性的影响">第三章 TiO₂纳米管载米诺环素对成骨细胞活性的影响
    3.1 材料
        3.1.1 主要仪器和设备
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 实验细胞
        3.1.4 主要软件
    3.2 方法
        3.2.1 样品制备及分组
        3.2.2 细胞培养
        3.2.3 细胞粘附检测
        3.2.4 细胞增殖检测
        3.2.5 细胞内碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性检测
        3.2.6 细胞胶原分泌检测
        3.2.7 细胞外基质矿化检测
        3.2.8 成骨相关基因表达水平
    3.3 结果
        3.3.1 细胞黏附
        3.3.2 细胞增殖
        3.3.3 碱性磷酸酶活性鉴定
        3.3.4 细胞胶原分泌检测
        3.3.5 细胞外基质分析
        3.3.6 成骨相关基因检测
    3.4 讨论
    3.5 小结
2纳米管载米诺环素对施万细胞生物行为的影响">第四章 TiO₂纳米管载米诺环素对施万细胞生物行为的影响
    4.1 材料
        4.1.1 仪器和耗材
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要软件
        4.1.4 实验细胞
    4.2 方法
        4.2.1 施万细胞的培养
        4.2.2 施万细胞在形态观察
        4.2.3 CCK-8检测细胞增殖情况
        4.2.4 流式细胞仪检测细胞活性
        4.2.5 RT-qPCR检测NGF及GDNF mRNA表达情况
        4.2.6 Western blot检测蛋白表达情况
    4.3 结果
        4.3.1 施万细胞形态观察
        4.3.2 CCK-8检测细胞增殖情况
        4.3.3 流式细胞检测细胞活性
        4.3.4 NGF及GDNFmRNA表达情况
        4.3.5 NGF及GDNF蛋白表达情况
    4.4 讨论
    4.5 小结
2纳米管载米诺环素对施万细胞迁移影响">第五章 TiO₂纳米管载米诺环素对施万细胞迁移影响
    5.1 材料
        5.1.1 仪器设备
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 主要软件
        5.1.4 实验细胞
    5.2 方法
        5.2.1 细胞培养
        5.2.2 细胞划痕实验
        5.2.3 Western blot检测整合素β1及其下游信号分子的表达
        5.2.4 细胞转染
        5.2.5 RT-PCR验证整合素β1沉默情况
        5.2.6 Western blot验证整合素β1沉默情况
        5.2.7 Transwell检测细胞迁移
    5.3 结果
2纳米管载米诺环素对施万细胞迁移的影响">        5.3.1 TiO₂纳米管载米诺环素对施万细胞迁移的影响
        5.3.2 Western-blot检测施万细胞integrinβ1及其下游分子的表达
        5.3.3 整合素β1基因沉默情况
        5.3.4 Transwell检测Integrinβ1沉默后药物对施旺细胞的迁移能力的作用
    5.4 讨论
    5.5 小结
参考文献
全文结论
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]钛种植体羟基磷灰石和神经生长因子复合涂层的制备及缓释性能研究[J]. 张鹏,管红雨,钟小君.  广东牙病防治. 2014(05)
[2]牙种植体周围骨内神经感受功能的初步研究[J]. 乔士冲,吕晓飞,庄龙飞,姜焕焕,张志勇,赖红昌.  上海口腔医学. 2011(02)
[3]促进周围神经再生的药物研究进展[J]. 喜杰,敖强.  内蒙古民族大学学报(自然科学版). 2010(01)
[4]种植义齿的骨感知现象及研究[J]. 林野,陈琰.  中华口腔医学研究杂志(电子版). 2008(04)
[5]甲基泼尼松龙对体外培养兔雪旺细胞迁移及增殖的影响[J]. 蔡鸿敏,吴学建.  郑州大学学报(医学版). 2008(02)
[6]米诺环素对体外培养的成年大鼠牙槽骨成骨细胞生物活性的影响[J]. 张文怡,刘洪臣,吴霞,鄂玲玲,吕燕.  中华老年口腔医学杂志. 2007(03)
[7]免疫抑制对大鼠周围神经损伤再生的影响[J]. 孙美庆,季正伦,江华,张敬德.  第二军医大学学报. 2006(09)
[8]口腔种植修复临床效果十年回顾研究[J]. 林野,李健慧,邱立新,邸萍,胡秀莲,王兴.  中华口腔医学杂志. 2006(03)
[9]NGF和bFGF联合治疗大鼠坐骨神经损伤的实验研究[J]. 梁崇礼,赵稳兴.  中国比较医学杂志. 2003(03)

博士论文
[1]二氧化钛纳米管成骨和抗菌的基础性研究[D]. 许志强.福建医科大学 2016

硕士论文
[1]静压力对PLGA-胶原支架上牙龈成纤维细胞整合素α5和整合素β1表达的影响[D]. 陈志兴.广西医科大学 2017
[2]不同纯钛表面形貌对神经细胞生物学行为影响的研究[D]. 尹程程.吉林大学 2016
[3]不同种植体表面形貌对神经再生影响的初步研究[D]. 李保胜.吉林大学 2013
[4]生物材料微图形生物活性表面对细胞生长行为的调控研究[D]. 聂煜东.重庆大学 2012



本文编号：3148350