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CCL2在大鼠实验性牙周炎中的表达的研究

发布时间:2021-04-20 12:18
  目的 通过牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激+正畸丝结扎建立大鼠实验性牙周炎模型,建模成功后去除结扎丝并进行基础治疗,取大鼠外周血、牙龈组织及颌骨样本观察大鼠实验性牙周炎基础治疗前后牙龈组织及外周血CCL2、转录因子c-Jun及IL-1β的表达变化,分析CCL2、转录因子c-Jun及IL-1β的含量变化情况与牙周组织炎症状态之间的关系,进一步探讨CCL2、转录因子c-Jun及IL-1β在牙周炎发病机制、病情进展等方面所起的作用。为探讨CCL2、转录因子c-Jun及IL-1β能否作为反映牙周炎症状况的指标以及炎性因子的改变与全身系统疾病的发生可能相关提供实验依据。方法 选取15只纯种6周龄雄性清洁级SD大鼠随机分为三组:空白对照组(CN组)、实验性牙周炎组(EP组)、实验性牙周炎+局部清创治疗组(SRP组),每组5只。采用正畸结扎丝结扎+P.g Lps注射法建立牙周炎大鼠模型。CN组无任何干预措施,SRP组予以去除结扎丝+局部清创治疗,每天1次,持续两周。分别于建模完成后、建模完成后2周及4周处死CN组、EP组和SRP组大鼠,采集各组大鼠牙龈组织、颌骨样本及外周血。实验结束前由经过专业训练的同一个... 

【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、对象和方法
    1.1 实验性牙周炎大鼠模型制备
        1.1.1 主要仪器及材料
        1.1.2 试剂
        1.1.3 实验动物的选取
        1.1.4 纳入标准
        1.1.5 动物分组
        1.1.6 动物模型的建立
        1.1.7 标本的留取
        1.1.8 造模成功观察指标
    1.2 组织学实验
        1.2.1 仪器和材料
        1.2.2 主要试剂
        1.2.3 制作石蜡切片
        1.2.4 HE染色
        1.2.5 TRAP染色检测破骨细胞(OCs)的表达
        1.2.6 免疫组化(S‐P法)
    1.3 ELISA检测血清中CCL2及IL‐1β的表达
        1.3.1 仪器和材料
        1.3.2 试剂
        1.3.3 实验步骤
    1.4 PCR检测牙龈及外周血中IL‐1β、CCL2及c‐Jun的表达
        1.4.1 仪器和材料
        1.4.2 试剂
        1.4.3 总RNA提取(Trizol法)
        1.4.4 RNA质量检测
        1.4.5 第一链cDNA合成
        1.4.6 PCR产物的检测
        1.4.7 real‐timePCR检测
    1.5 统计学分析
二、结果
    2.1 牙周指标检测
    2.2 HE染色结果
    2.3 TRAP染色检测破骨细胞(OCs)的表达
    2.4 免疫组化染色结果
        2.4.1 牙龈组织中IL‐1β的免疫组化结果
        2.4.2 牙龈组织中CCL2的免疫组化结果
        2.4.3 牙龈组织中c‐Jun的免疫组化结果
    2.5 ELISA检测结果
    2.6 PCR检测结果
        2.6.1 总RNA样品纯度的测定
        2.6.2 RT‐PCR检测牙龈组织中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表达
        2.6.3 real–timePCR检测牙龈组织中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表达
        2.6.4 real–timePCR检测外周血白细胞中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表达
三、讨论
    1 实验性牙周炎大鼠模型的建立
    2 CCL2与牙周炎间的关系
    3 c‐Jun与牙周炎间的关系
    4 IL‐1β与牙周炎间的关系
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】:
期刊论文
[1]牙周基础治疗前后慢性牙周炎患者龈沟液中β-防御素2及白细胞介素-1β表达水平的变化研究[J]. 刘贞敏,李雅灵,牙祖科,陶人川.  广西医科大学学报. 2015(02)
[2]糖尿病牙周病大鼠牙周龈沟液中TNF-α,IL-1β和LPS水平的研究[J]. 姜竹玲,高睿,陈萌萌,李莹,王祥,张斌.  口腔医学研究. 2014(06)
[3]MCP-1和ICAM-1在大鼠实验性牙周炎牙周纤维中的表达[J]. 刘玉三,毕良佳,林江,代佳音,苏鑫,毕佳锐.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2013(02)
[4]IL-1β对人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响[J]. 张兰,孙琳琳,丁岩,宋健玲.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2012(08)
[5]IL-1β与IL-10mRNA在牙龈组织中的表达[J]. 秦春平.  临床口腔医学杂志. 2012(07)
[6]MCP-1对成骨前体细胞凋亡及凋亡调控蛋白Caspase3表达的影响[J]. 王谊,李松英.  现代口腔医学杂志. 2010(04)
[7]侵袭性牙周炎患者血浆白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的检测[J]. 孙晓军,孟焕新,陈智滨,徐莉,张立,释栋,冯向辉.  北京大学学报(医学版). 2008(01)
[8]实验性牙周炎动物模型的研究进展[J]. 宋忠臣,束蓉.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2005(10)
[9]Duffy抗原趋化因子受体抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长和肺转移[J]. 王杰,欧周罗,侯意枫,罗建民,陈奕,周晋,沈镇宙,丁健,邵志敏.  中华医学杂志. 2005(29)
[10]龈沟液中的炎症调节因子——白细胞介素8[J]. 谢昊,曹采方,马大龙,孟焕新.  中华口腔医学杂志. 1997(03)

硕士论文
[1]TGF-β1对IL-1β诱导人牙周膜成纤维细胞分泌HGF影响的研究[D]. 段燕.山西医科大学 2011



本文编号:3149665

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