NELL1慢病毒载体转染人牙周膜干细胞对其成骨分化影响的实验研究

发布时间：2021-04-24 21:07

　　背景：NELL1，一种与人颅缝早闭症（craniosynostosis,CS）颅缝过早融合相关的新型分泌型蛋白，能促进间充质干细胞的成骨分化。目的：研究NELL1对人牙周膜干细胞（humanperiodontalligamentstemcells,hPDLSC）体外成骨分化的作用并初步探讨其作用机制。方法：构建携带NELL1的慢病毒载体（lenti-NELL1），用以转染hPDLSCs，经矿化诱导液诱导培养后，通过检测成骨标志物碱性磷酸酶（alkalinephosphate,ALP）、骨钙素（osteocalcin,OCN）及钙沉积来评估NELL1对hPDLSCs的骨诱导作用。同时real-timePCR检测成骨重要的转录因子（Msx2、Runx2）mRNA的表达变化。实验以只携带报告基因EGFP的空载体lenti-EGFP转染的hPDLSCs为对照。结果：WesternBlot及real-timePCR证实构建的lenti-NELL1转染hADSCs能成功表达有生物学活性的NELL1蛋白。与对照相比，lenti-NELL1组ALP、OCN、钙沉积及Msx2mRNA都显著提高（p＜0.... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中英文缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
实验一、人牙周膜干细胞的分离、培养及生物学特性的研究
    摘要
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
实验二、携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体感染人牙周膜干细胞对其体外成骨分化影响的研究
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
实验三、人NELL1基因慢病毒载体的构建
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
实验四、NELL1慢病毒载体转染人牙周膜干细胞对其成骨分化影响的研究
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
全文总结
综述一、慢病毒载体的研究进展及应用
    摘要
    1 慢病毒载体分子构造
    2 慢病毒载体的遗传毒性
    3 细胞工程应用
    4 动物模型应用
    参考文献
综述二、NELL1基因促进成骨作用的研究及其应用
    摘要
    1 NELL1基因的发现
    2 NELL1基因的结构
    3 NELL1蛋白的结构
    4 Nel1在小鼠骨骼发育中的作用
    5 NELL1促进骨软骨再生的应用研究
    6 NELL1促进成骨的可能机制
    参考文献
附图
个人简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]改良法分离培养人牙周膜干细胞[J]. 申涛,常慧君,简从相,杨彦春,周继祥.  华西口腔医学杂志. 2011(01)
[2]MOI对HEK293细胞感染病毒后的生长代谢和腺病毒扩增效率的影响[J]. 刘旭平,范里,朱明龙,张旭,谭文松.  高校化学工程学报. 2010(04)
[3]人牙周膜干细胞的分离培养及生物学特性研究[J]. 潘峰,丁寅,王光,赵宇,倪华.  中国美容医学. 2008(05)
[4]谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生产的影响[J]. 张淑香,李东晓,朱明龙,谭文松,张嗣良.  高校化学工程学报. 2008(01)
[5]慢病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用[J]. 李跃萍,宋丽萍,邱曙东.  现代肿瘤医学. 2006(12)
[6]rCHO细胞在葡萄糖限制流加培养过程中的生长与代谢特性[J]. 高量,游磊,朱明龙,谭文松.  高校化学工程学报. 2006(01)
[7]不同张应力对体外培养的人牙周膜成纤维细胞形态和纤维型肌动蛋白改变的影响[J]. 彭庭莉,杨军,周继祥,杨彦春.  第三军医大学学报. 2005(09)
[8]酶消化组织块法原代培养人牙周膜成纤维细胞的初步研究[J]. 汤楚华,施生根,牛忠英,党平,郑燕华,史亮.  中华医学杂志. 2004(08)

博士论文
[1]慢病毒载体法高效转基因鸡制备技术研究[D]. 徐世永.南京农业大学 2007



本文编号：3158077