OLA1在口腔癌转移中的机制研究

发布时间：2021-05-09 01:51

　　口腔癌是头颈部较常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全身常见恶性肿瘤中位列第六位。口腔癌患者的五年生存率为50%～60%,但I期临床疾病患者的五年生存率可达到80%以上,而晚期的口腔癌患者的生存率仅有20%,不幸的是三分之二的患者在癌症晚期才被临床诊断,此时癌症已经发生扩散和转移,难于治疗且治疗后预后极差。因此一方面需要通过早期发现,早期诊断和早期治疗来提高口腔癌患者的生存率,另一方面需要开发研究更具有靶向性的治疗方法来应对口腔癌的转移。OLA1是一个非常古老的、在进化中高度保守个的GTP酶,已有研究表明OLA1与肿瘤能量代谢、肿瘤细胞增殖、凋亡和迁移有着密切关系,深入研究OLA1与口腔癌的关系是一个潜在的抗癌策略。我们首先通过Western20blot实验检测了OLA1在口腔正常角质细胞（Nhoks）和口腔癌细胞,包括口腔癌高转移细胞Um-1和Cal-27以及口腔原位癌细胞Um-2中的表达差异,实验结果发现,OLA1在口腔癌细胞中的表达显著低于口腔正常细胞,且随着口腔癌细胞转移程度的增加OLA1的表达逐渐减少。因此我们猜想OLA1在口腔癌中是一个抑癌基因,对口腔癌转移起到至关重要的作用。进... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 口腔癌概述
        1.1.1 口腔癌发生率与死亡率
        1.1.2 引发口腔癌的危险因素
        1.1.3 口腔癌的管理策略
        1.1.4 口腔癌与转移
    1.2 OLA1概述
        1.2.1 OLA1功能
        1.2.2 OLA1与癌症
    1.3 EMT概述
        1.3.1 EMT
        1.3.2 EMT与癌症转移
    1.4 本文研究内容
2 实验材料与方法
    2.1 实验试剂
    2.2 主要溶液配制
    2.3 主要实验仪器
    2.4 实验方法
3 OLA1在口腔癌中的功能探索
    3.1 OLA1在口腔正常细胞与口腔癌细胞中的表达差异
    3.2 OLA1-siRNA的细胞转染效率检测
    3.3 敲低OLA1的表达对口腔癌增殖能力的影响研究
    3.4 OLA1对口腔癌转移的作用研究
        3.4.1 划痕实验
        3.4.2 Transwell迁移实验
    3.5 本章小结
4 构建稳转细胞系探究OLA1对口腔癌转移和侵袭能力的影响
    4.1 体外构建OLA1过表达Um-1细胞系和OLA1低表达Um-2 细胞系
    4.2 干扰细胞内OLA1的表达对细胞形态的影响
    4.3 干扰细胞内OLA1的表达对细胞转移能力的影响
    4.4 干扰细胞内OLA1的表达对细胞侵袭能力的影响
    4.5 OLA1对紫杉醇的耐药反应研究
        4.5.1 OLA1对紫杉醇的应激反应研究
        4.5.2 MTT法检测OLA1对Um-1细胞的耐药性影响
        4.5.3 Annexin Ⅴ-FITC/ PI染色法检测OLA1对Um-1细胞的耐药性影响
        4.5.4 流式细胞仪检测OLA1对Um-1细胞的干性影响
    4.6 本章小结
5 OLA1在口腔癌转移和侵袭中的机制研究
    5.1 OLA1通路筛选
    5.2 OLA1对EMT通路标志物的影响
    5.3 OLA1对TGF-β通路标志物的影响
    5.4 本章小结
结论
参考文献
附录 A 唇癌和口腔癌AJCC(2010年第七版)TNM分期表
附录 B 中英文对照表
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3176380