长链非编码RNA MALAT1在慢性牙周炎中的作用及调控机制的研究

发布时间：2021-05-15 11:49

　　目的:前期基因芯片结果发现:长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）肺腺癌转移相关转录因子1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1,MALAT1）在慢性牙周炎炎症牙龈组织中的表达与健康牙龈组织相比存在差异,表明其可能在慢性牙周炎的发生发展中发挥一定作用。本研究旨在验证不同状态人牙龈组织中MALAT1的表达差异;生物信息学分析MALAT1的靶位点后,探索人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGFs）中MALAT1对炎性细胞因子的调节通路,为阐明慢性牙周炎的发病机制和寻求慢性牙周炎的治疗新靶点提供依据。方法:1.患者知情同意后,获取牙周健康人群及慢性牙周炎患者的牙龈组织,提取总RNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应（real time polymerase chain reaction,real time PCR）检测不同来源的牙龈组织中MALAT1的表达水平,分析MALAT1与慢性牙周炎之间的关系。2.生物信息学分析发现,小分子RNA（microRNA... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、MALAT1在不同状态牙龈组织中的表达
    1.1 对象和方法
        1.1.1 主要设备和仪器
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要试剂的配制
        1.1.4 研究对象和方法
    1.2 结果
        1.2.1 纳入健康及慢性牙周炎志愿者的一般情况分析
        1.2.2 real time PCR检测MALAT1的表达水平
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、体外细胞检测MALAT1的靶位点和结合方式
    2.1 对象和方法
        2.1.1 主要设备和仪器
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要试剂的配制
        2.1.4 研究对象和方法
    2.2 结果
        2.2.1 HGFs的培养
        2.2.2 RT-PCR检测MALAT1和miR-20a在细胞水平的表达
        2.2.3 双荧光素报告基因实验检测MALAT1与miR-20a的结合
        2.2.4 双荧光素报告基因实验检测miR-20a与TLR4的结合
        2.2.5 MALAT1/mi R-20a/TLR4/Ago2 复合体的调控作用
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、P.g LPS或E.coli LPS刺激对人牙龈成纤维细胞中MALAT1、miR-20a、TLR4及炎性细胞因子表达的影响
    3.1 对象和方法
        3.1.1 主要设备和仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要试剂的配制
        3.1.4 研究对象和方法
    3.2 结果
        3.2.1 LPS对HGFs中MALAT1、miR-20a和TLR4表达水平的影响
        3.2.2 LPS对HGFs中炎性细胞因子m RNA表达水平的影响
    3.3 讨论
    3.4 小结
四、HGFs中MALAT1对炎症细胞因子表达的调节作用
    4.1 对象和方法
        4.1.1 主要设备和仪器
        4.1.2 主要实验试剂
        4.1.3 主要试剂的配制
        4.1.4 研究对象和方法
    4.2 结果
        4.2.1 HGFs中转染试剂的转染效率
        4.2.2 HGFs中si-MALAT1、miR-20a mimics及sno-MALAT1的效率
        4.2.3 si-MALAT1对HGFs中miR-20a及炎性细胞因子表达水平的影响
        4.2.4 sno-MALAT1对HGFs中miR-20a及炎性细胞因子表达水平的影响
        4.2.5 miR-20a mimics对HGFs中MALAT1及炎性细胞因子表达水平的影响
        4.2.6 LPS刺激下改变MALAT1或miR-20 水平对TLR4表达水平的影响
    4.3 讨论
    4.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 长链非编码RNA MALAT1的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性牙周炎龈沟液中趋化因子白细胞介素-8水平Meta分析[J]. 冯萍珍,保森竹.  中国实用口腔科杂志. 2017(11)
[2]IL-1β、IL-6、IL-10在慢性牙周炎不同临床阶段的免疫调节作用[J]. 莫丽妮,林旭征.  包头医学院学报. 2017(10)
[3]Toll样受体mRNA水平与牙龈炎症相关性研究[J]. 宋立婷,刘丽伟,邓嘉胤,朱东望,蒋少云.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2016(06)
[4]miR-20a对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响[J]. 杨倩娟,刘文佳,常文悦,郭晓睿,王红,陈琦,陆群.  实用口腔医学杂志. 2016(02)
[5]牙周基础治疗对牙周炎患者龈沟液和血清IL-6、IL-8和PAF水平的影响[J]. 赵靓,曹远.  实用临床医药杂志. 2015(19)
[6]牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙龈成纤维细胞炎症刺激作用的研究[J]. 魏丛丛,蒋少云,邓嘉胤.  天津医药. 2013(05)
[7]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China.  International Journal of Oral Science. 2011(03)
[8]TNF-α、IL-1β及IL-6与糖尿病及牙周炎之间的关系[J]. 吴莹莹,刘洪臣.  中华老年口腔医学杂志. 2011(02)
[9]慢性牙周炎治疗前后患牙龈沟液中IL-8和TNF-α水平变化比较[J]. 朱治宇,刘国勤.  细胞与分子免疫学杂志. 2010(11)
[10]非编码基因MALAT1功能性序列真核表达载体的构建及其在SW620细胞中的表达[J]. 杨敏慧,王双双,王晓燕,徐川,李祖国.  热带医学杂志. 2010(03)



本文编号：3187581