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成对盒基因Pax9的亚细胞定位及对细胞生物学行为的调控研究

发布时间:2021-05-25 07:12
  本研究的目的在于探讨成对盒基因Pax9的功能,实验从Pax9的亚细胞定位入手研究了Pax9表达改变对细胞生物学行为的影响及可能调控机制。 实验以PCR-重组的方法构建了GFP-Pax9融合蛋白真核表达载体pEGFP-Pax9(GenBankTM检索号:DQ022572),重组质粒转染不同物种来源的哺乳动物细胞CHO、Cos7后在核酸水平(RT-PCR)和蛋白质水平(Western Blot和免疫组织化学)检测细胞与亚细胞水平Pax9的表达,证实了GFP-Pax9融合蛋白的形成;研究用直接荧光(GFP-Pax9融合蛋白)和间接荧光(荧光标记Pax9抗体)两种方式明确标明Pax9在细胞中的作用位置为细胞核;以不同物种来源的细胞进行研究未发现差异结果表明Pax9的作用极为保守。 在不表达Pax9的细胞系Cos7中瞬时表达Pax9,以CellTiter 96?Aqueous one solution cell prol iferation assay检测Pax9—过性表达对细胞生物学行为的影响,流式细胞仪分析了Pax9表达对细胞周期的改变... 

【文章来源】:武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:151 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
中文摘要
英文摘要
引言
实验流程
正文
文献综述
实验研究
    实验一 绿色荧光蛋白-成对盒基因Pax9融合蛋白真核表达质粒的构建、表达及Pax9亚细胞定位
    实验二 Pax9瞬时表达对细胞生物学行为的影响及信号路径探讨
    实验三 绿色荧光蛋白-成对盒基因Pax9融合蛋白慢病毒质粒的构建及Pax9稳定表达细胞的筛选
    实验四 不同方法表达Pax9 siRNA及其干扰能力初步比较
附录
个人简历
后记


【参考文献】:
期刊论文
[1]2例多数牙先天缺失患儿及其父母的Pax9基因突变检测[J]. 袁林天,文玲英,杨富生,罗亚宁,姚元庆,樊淑梅,刘勇.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2004(03)



本文编号:3204920

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