体外培养人Malassez上皮剩余细胞及鉴定

发布时间：2021-05-31 21:27

　　目的：分离培养人牙周膜内Malassez上皮剩余细胞,探讨一种简便、原代培养成功率高、可重复性好的细胞培养方法,为进一步在体外研究Malassez上皮剩余细胞的生物学特性及功能提供实验条件。方法：选取12～25岁青少年因正畸拔除的前磨牙,采用组织块培养法和酶消化法进行牙周膜细胞原代培养。先使用含血清的DMEM培养液培养,当细胞融合达50%左右时,对Malassez上皮剩余细胞进行选择性培养,按比例逐渐减少培养液中血清含量,同时增加细胞生长所需的因子,直到完全使用无血清培养基。采用形态学观察、免疫组化方法鉴定其来源,并绘制生长曲线。结果：（1）分离下的牙周膜,在经过初期含血清培养基的组织块培养后,5-16天可见组织块周围有细胞爬出,大部分是成纤维细胞,细胞形态呈长梭形,其间有部分多角形或“铺路石”样细胞,为上皮细胞,胞浆均匀,轮廓清晰。（2）酶消化法培养的牙周膜细胞,在12小时后即有细胞的贴壁变形,2-3天后大部分细胞贴壁生长,所得细胞大部分也是成纤维细胞,含少量上皮细胞,成纤维细胞和上皮细胞的形态学特征与组织块法培养的相似。（3）经过12-24天牙周膜细胞原代培养,细胞融合可达50%左... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

消化后的细胞呈悬浮状，12h后个别贴壁细胞开始伸展变形(x100)

48h后大多数细胞贴壁变形(xioo}

纤维细胞呈长梭形，放射状排列;ERM细胞(箭头所示)呈扁平多角形(xl00)

【参考文献】：
期刊论文
[1]三种方法原代培养人牙周膜细胞[J]. 蒋俊强,王忠朝,黎春晖,蔡炜.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(23)
[2]不同年龄供体人牙周膜细胞原代培养成功率的比较[J]. 闫嘉晴,林崇韬,孙营营.  吉林大学学报(医学版). 2010(01)
[3]牙周膜细胞体外培养技术的发展及应用[J]. 舒丹,杨四维.  口腔医学. 2008(07)
[4]人体口腔粘膜上皮细胞体外培养和鉴定[J]. 陈文,李森恺,史宏道,李养群,蒋华,贾文英,祝君梅.  现代口腔医学杂志. 2005(05)



本文编号：3209004