7-脱氢胆固醇还原酶基因在小鼠胚胎腭突发育中的作用

发布时间：2021-06-12 01:16

　　目的：研究7-脱氢胆固醇还原酶基因（Dhcr7）在小鼠胚胎腭突发育中的表达及表达量变化,Dhcr7表达下调对腭突发育融合的影响,及Dhcr7在腭突发育中参与的音猬因子（Shh）信号通路的研究。方法：1：取E13.5、E14.5和E15.5天的小鼠胚胎的腭突,免疫组织化学观察Dhcr7蛋白在腭突中的表达定位,逆转录式聚合酶链式反应法检测Dhcr7mRNA的表达变化,Western blot法检测Dhcr7蛋白的表达变化。2：构建抑制Dhcr7基因表达的siRNA重组腺病毒载体。取E13.5天的腭突进行体外培养,随机分为正常对照组、阴性对照腺病毒组和siDhcr7-腺病毒组,培养48h后分别固定和提取总RNA、总蛋白,进行组织染色、扫描电镜和RT-PCR、WB分析,siDhcr7-腺病毒组于48h后更换培养基随机分为四组分别添加Ong/ml、200ng/ml、400ng/ml和600ng/ml浓度的胆固醇,继续培养72h后固定,SEM和组织染色观察融合情况。3：取E13.5天腭突进行培养,分为空白对照组、siDhcr7-腺病毒组和Dhcr7抑制后加胆固醇组,前两组于培养48后更换不含胆固醇... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一部分 Dhcr7在小鼠胚胎腭突发育中的表达及表达量变化
    1、目的
    2、材料和方法
    3、结果
    4、讨论
第二部分 腺病毒载体介导的RNA干扰抑制体外培养腭突Dhcr7表达的研究
    1、目的
    2、材料和方法
    3、结果
    4、讨论
第三部分 体外腭突培养Dhcr7沉默对Shh信号通路影响的研究
    1、目的
    2、材料和方法
    3、结果
    4、讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录
致谢



本文编号：3225655