siRNA-Nav1.5干扰口腔鳞癌HSC-3细胞生物学行为改变的研究
发布时间：2021-06-13 23:30
目的在我国,癌症在口腔颌面部恶性肿瘤中更为常见,肉瘤较少见。在癌症中又以口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是最多见的,一般占80%以上,其恶性程度较高,区域淋巴结转移常常发生,晚期发生的远处转移严重威胁着人类的健康。现临床常规治疗就是肿瘤的放化疗加手术治疗,但放疗和化疗的副作用较为明显,大范围的手术切除可造成组织缺损,而且由于OSCC较容易发生转移这一特点,导致复发率居高不下,患者的五年生存率仅为50%左右,所以寻找更加有效的治疗方法刻不容缓。近年来,定点分子靶向治疗受到越来越多的关注,并且大量研究已报道电压门控钠离子通道（voltage-gated sodium channels,VGSC）在多种癌症中高表达,不论是通过特异性药物阻断VGSC功能还是特异性降低其表达都可有效降低肿瘤的侵袭和增殖,这提示VGSC可能是癌症治疗的新靶点。在对不同亚型的VGSC的研究中发现,不同癌症中发挥主要作用的VGSC亚型各不相同,课题组前期研究发现,Nav1.5亚型与OSCC的发生发展密切相关,表明它可能成为治疗OSCC的潜在靶点。但对其更深层次的分子...
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
免疫组化法检测Nav1.5蛋白的表达（×100）
安徽医科大学硕士学位论文4.2 HSC-3 细胞株中 Nav1.5 的表达定位为了确定在选定的细胞系 HSC-3 中 Nav1.5 的表达，使用免疫荧光技术通过激光共聚焦显微镜观察细胞中的荧光染色。 高倍镜下清楚观察到在细胞核外可见荧光标记的 Nav1.5 呈红色均匀分布， DAPI 把胞核染成蓝色，大致呈椭圆形，核质比较大，表明 HSC-3 细胞株中 Nav1.5 呈阳性表达，且主要定位在细胞核外，见图 2。
图 3 转染效率检测A：转染 FAM 标记 siRNA 明场镜下；B：明场同一视野下荧光镜下（×200）Figure 3 Transfection efficiency testA: Transfection of FAM-labeled siRNA under bright field mirror; B: Bright field underthe same field of view under fluoroscopy (×200)4.3.2 siRNA 沉默效率的检测基因沉默是否成功，最后还是要看目的基因所编码产物是否表达下降，因此，使用 qRT- PCR 和 Western 印迹分别从 mRNA 和蛋白质水平检测相应产物的表达水平。 从而来鉴定 siRNA 的沉默效率，进而筛选出沉默效率最佳的 siRNA 片段用于进一步实验研究。 qRT- PCR 结果显示，与未转染组（CON 组）相比，用 3 种
【参考文献】：
期刊论文
[1]PCNA及P53在口腔癌中的表达及临床意义[J]. 沈建军,王燕. 科学技术创新. 2018(09)
[2]RNAi干扰电压门控钠通道scn8a基因对人宫颈癌SiHa细胞侵袭转移的影响[J]. 潘惠艳,赵群,詹阳,赵丽红,张卫华,吴玉梅. 首都医科大学学报. 2012(03)
[3]不同化疗方案对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对PCNA表达的影响[J]. 王玉栋,刘巍,纪芝民,张志刚,王俊灵,严霞,张祥宏. 中国癌症杂志. 2007(02)
本文编号：3228569
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
免疫组化法检测Nav1.5蛋白的表达（×100）
安徽医科大学硕士学位论文4.2 HSC-3 细胞株中 Nav1.5 的表达定位为了确定在选定的细胞系 HSC-3 中 Nav1.5 的表达，使用免疫荧光技术通过激光共聚焦显微镜观察细胞中的荧光染色。 高倍镜下清楚观察到在细胞核外可见荧光标记的 Nav1.5 呈红色均匀分布， DAPI 把胞核染成蓝色，大致呈椭圆形，核质比较大，表明 HSC-3 细胞株中 Nav1.5 呈阳性表达，且主要定位在细胞核外，见图 2。
图 3 转染效率检测A：转染 FAM 标记 siRNA 明场镜下；B：明场同一视野下荧光镜下（×200）Figure 3 Transfection efficiency testA: Transfection of FAM-labeled siRNA under bright field mirror; B: Bright field underthe same field of view under fluoroscopy (×200)4.3.2 siRNA 沉默效率的检测基因沉默是否成功，最后还是要看目的基因所编码产物是否表达下降，因此，使用 qRT- PCR 和 Western 印迹分别从 mRNA 和蛋白质水平检测相应产物的表达水平。 从而来鉴定 siRNA 的沉默效率，进而筛选出沉默效率最佳的 siRNA 片段用于进一步实验研究。 qRT- PCR 结果显示，与未转染组（CON 组）相比，用 3 种
【参考文献】：
期刊论文
[1]PCNA及P53在口腔癌中的表达及临床意义[J]. 沈建军,王燕. 科学技术创新. 2018(09)
[2]RNAi干扰电压门控钠通道scn8a基因对人宫颈癌SiHa细胞侵袭转移的影响[J]. 潘惠艳,赵群,詹阳,赵丽红,张卫华,吴玉梅. 首都医科大学学报. 2012(03)
[3]不同化疗方案对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对PCNA表达的影响[J]. 王玉栋,刘巍,纪芝民,张志刚,王俊灵,严霞,张祥宏. 中国癌症杂志. 2007(02)
本文编号：3228569
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/kouq/3228569.html
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