西安地区出土3000年前人釉原蛋白基因的分析

发布时间：2021-06-25 02:08

　　随着现代分子生物学的不断发展及实验技术的不断进步,古DNA研究已经广泛应用于考古学、人类学、生物学及遗传学等诸多领域,为考古发掘出的古代人物的身份鉴定、人类的演化迁徙、生物的起源进化及疾病的遗传流行等提供了分子生物学上的证据。在釉质发生的早期阶段,釉质中的蛋白质含量高达20%³0%。其中,釉原蛋白是釉质发育过程中最为丰富的蛋白成分,在釉质矿化的第一阶段占釉基质的60%⁹0%。在釉质的形成过程中,釉原蛋白作为最主要的细胞外基质蛋白可能在釉质微观结构模式形成和演化过程中扮演了重要的角色。釉原蛋白基因在不同种属中均有表达,被看做种系发生分化的一个重要标志物。人类釉原蛋白基因是分别位于X和Y染色体上的一对等位基因,其在两条性染色体上的不同表达成为性别鉴定的重要方法。本课题建立了一种利用古人类牙齿提取基因组DNA的简便方法,从西安地区出土3000年前人牙齿中提取出基因组DNA,设计釉原蛋白基因特异性引物,采用PCR技术对所选样本进行了性别鉴定,同时对西安地区出土3000年前人釉原蛋白基因高可变区变异位点进行了筛查,并比较了西安地区出土3000年前人与现... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

所选牙齿样本照片

样本 A260 A280 260/280 浓度(ng/μl)M207 0.372 0.351 1.06 18.6M328 0.308 0.251 1.23 15.4T 0.348 0.275 1.27 17.4N1 0.318 0.249 1.28 15.9N2 2.604 2.184 1.19 130.23.2 电泳结果图 2 是不同年代牙齿样本 PCR 扩增产物的电泳结果，5 个样本均出现阳性特异性条带，其中样本 N2 条带较亮。在对样本残存牙髓组织及牙本质碎屑的收集过程中发现样本 N2 尚有成型的干尸状牙髓组织，而其它样本均为碎末状牙髓、牙本质混合组织，因此也说明含有较丰富细胞成分的牙髓组织比细胞成分含量较少的牙本质碎屑更容易提取到 DNA 片段。

图 3 釉原蛋白基因内含子 1 区正向测序图形图 4 釉原蛋白基因内含子 1 区反向测序图形4 讨论牙釉质的主要成分是羟磷灰石晶体，其硬度约为洛氏硬度值 340，相当于牙本质硬度（70KHN）的 5 倍，是人体中最硬的组织[111]。在考古发掘出的古人类遗骸中，牙齿是保存最完整的人体组织。同时，牙髓腔是一个密闭的结构，除根尖孔外不与外界环境相通，避免了环境变化对古 DNA 的影响，也减少了古 DNA 受污染的机会[24]。然而，传统的从牙齿中提取 DNA的方法是将牙齿进行表面的去污染处理后用液氮研磨机将其研磨成牙粉以

【参考文献】：
期刊论文
[1]单核苷酸多态性的特点及其在医学中的应用进展[J]. 席素雅,韩雅玲.  辽宁医学杂志. 2007(01)
[2]考古样品中Amelogenin同源基因的提取和检测[J]. 张虎勤,杨周岐,刘芳娥,张金,赵文明.  法医学杂志. 2006(03)
[3]孕妇血浆Amelogenin基因6bp差异检测对产前胎儿性别的鉴定价值[J]. 鹿亚超,朱斌,姜海燕,王丽娟,高锦声.  苏州大学学报(医学版). 2005(03)
[4]X染色体与性别鉴定[J]. 吕梅励,吴梅筠,梁伟波,张林.  刑事技术. 2004(01)
[5]一种高效的树木总DNA提取方法[J]. 张博,张露,诸葛强,王明庥,黄敏仁.  南京林业大学学报(自然科学版). 2004(01)
[6]人类SNP多态性的研究及应用[J]. 张凤珍,郝岗平,张媛英.  泰山医学院学报. 2003(02)
[7]法医人类学研究进展[J]. 陈华.  解剖学研究. 2002(04)
[8]古代DNA研究实验技术[J]. 杨淑娟,赖旭龙,唐先华,盛桂莲.  遗传. 2002(05)
[9]单核苷酸多态性的研究进展[J]. 杨昭庆,洪坤学.  国外医学.遗传学分册. 2000(01)
[10]方兴未艾的古代DNA的研究[J]. 蔡胜和,杨焕明.  遗传. 2000(01)



本文编号：3248279