LPE对五种致龋菌生长及表兄链球菌相关酶活性的影响

发布时间：2021-06-25 22:38

　　目的牙菌斑生物膜是龋病发生的基础。变异链球菌、表兄链球菌和内氏放线菌等是构成牙菌斑生物膜的主要致龋菌。细菌通过疏水作用吸附于牙釉质表面的获得性膜,利用葡糖基转移酶催化基质中的蔗糖合成葡聚糖,葡聚糖可诱导牙面上细菌的粘附和聚集,促进牙菌斑形成。牙菌斑中的细菌代谢产酸,主要是无氧酵解中乳酸脱氢酶催化丙酮酸生成乳酸,酸的累积造成牙釉质的局部脱矿,导致龋损形成。本课题组在国内外首先开展柠檬提取物（Lemon peel extract,LPE）防龋的系列研究,LPE是由水果柠檬中提取的一种淡黄色液体,主要成分是柠檬烯及其同分异构体（占总含量的79%）。本实验通过研究LPE对5种致龋菌（变异链球菌、血链球菌、表兄链球菌、内氏放线菌、嗜酸乳杆菌）的生长抑制作用,对表兄链球菌致龋相关酶（葡糖基转移酶、乳酸脱氢酶）的活性及代谢产物（水不溶性多糖）的抑制作用,探讨LPE抑制口腔致龋菌生长,抑制表兄链球菌的附着性、代谢产酸的作用机制,同时分析代谢酶在细菌致龋作用中的意义。方法1.LPE提取及成分分析采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,在一定的色谱质谱条件下,测得柠檬挥发油成分GC.MS总离子流色谱图（TIC）。根据... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、LPE对口腔主要致龋菌生长的影响
    1.1 对象和方法
        1.1.1 材料与仪器
        1.1.2 实验菌种和培养基
        1.1.3 菌液制备
        1.1.4 LPE的提取和成分分析
            1.1.4.1 LPE提取方法
            1.1.4.2 LPE成分分析
        1.1.5 LPE最低抑菌浓度
        1.1.6 菌落计数法测量LPE对五种口腔致龋菌生长的影响
        1.1.7 统计方法
    1.2 结果
        1.2.1 LPE成分GC-MS总离子流色谱图及分析结果
        1.2.2 LPE对各菌的最低抑菌浓度MIC值
        1.2.3 五种致龋菌在各时间点的1gCFU/ml值
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、LPE对表兄链球菌葡糖基转移酶活性和细胞外多糖含量的影响
    2.1 对象和方法
        2.1.1 材料与仪器
        2.1.2 主要试剂的配制
        2.1.3 LPE对表兄链球菌生长的影响
        2.1.4 GTF与WIG菌液培养及实验分组
            2.1.4.1 实验菌株及菌液制备
            2.1.4.2 LPE溶液的稀释及实验分组
            2.1.4.3 表兄链球菌菌液培养
        2.1.5 葡萄糖标准曲线和葡聚糖标准曲线的测定
            2.1.5.1 葡萄糖标准曲线测定
            2.1.5.2 葡聚糖标准曲线测定
        2.1.6 GTF的提取和活性测定
        2.1.7 胞外WIG含量的测定
        2.1.8 统计学处理
    2.2 结果
        2.2.1 LPE对表兄链球菌生长的影响
        2.2.2 葡萄糖标准曲线和葡聚糖标准曲线测定
        2.2.3 LPE溶液对表兄链球菌胞外WIG含量影响的测定
        2.2.4 LPE溶液对表兄链球菌GTF活性与WIG含量影响的相关性分析
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、LPE对表兄链球菌的乳酸脱氢酶活性和产酸能力的影响
    3.1 对象与方法
        3.1.1 材料与仪器
        3.1.2 实验菌株及菌液制备
        3.1.3 LPE溶液的稀释及实验分组
        3.1.4 菌液培养
        3.1.5 LPE溶液对表兄链球菌LDH的影响
        3.1.6 LPE溶液对表兄链球菌产酸能力的影响
        3.1.7 统计学处理
    3.2 结果
        3.2.1 LPE溶液对表兄链球菌LDH影响
        3.2.2 LPE溶液对表兄链球菌产酸能力影响
        3.2.3 LPE溶液对表兄链球菌LDH活性与△pH影响的相关性分析
    3.3 结论
    3.4 小结
结论
参考文献
附录
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3250075