hPDGF-B基因修饰的组织工程化复合物修复牙周组织缺损的实验研究

发布时间：2021-07-05 22:54

　　目的用携带人血小板源性生长因子-B （platelet-derived growth factor-B, PDGF-B）基因的真核表达质粒EX-A0380-M03转染Beagle犬牙龈成纤维细胞,复合脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix, ADM）体外构建组织工程化复合物,移植修复犬慢性Ⅱ。根分叉病变,探讨hPDGF-B基因修饰的牙龈成纤维细胞在牙周组织再生中的作用,为基因治疗与组织工程联合应用于牙周组织缺损再生治疗奠定基础。方法1.借助改良组织块法+半消化法分离培养Beagle犬牙龈成纤维细胞,手术、免疫细胞化学以及碱性磷酸酶法确定细胞来源;2.观察DMEM、RPMI1640两种培养液对Beagle犬牙龈成纤维细胞体外生物学活性的影响;3.转化、扩增、鉴定携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03,并利用脂质体将其转入Beagle犬牙龈成纤维细胞;RT-PCR、免疫细胞化学染色、ELISA以及Western Blot检测目的基因的转录和表达。4.体外基因转染后,观察细胞形态变化,MTT及流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡的情况。Realtime PCR法... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

刮治及用药后Beagle犬牙周组织状况

边缘锐利，大量上皮细胞游出，占据组上皮细胞成鹅卵石样排列（×100）角蛋白免疫组织化学染色染色阳性，胞浆着棕色；角蛋白染色阴性，胞染色阳性，胞浆内着棕色（×200）；B：角蛋白染

A：DMEM 组（×200）；B：RMPI 1640 组（×200）图 2-1 两种培养液培养 Beagle 犬牙龈成纤维细胞镜下的形态3. MTT 法检测两种培养液培养下细胞的增殖曲线。MTT法测量增殖曲线00.10.20.30.40.50.60.71 2 3 4 5 6 7 8天D值ODMEMRPMI1640

【参考文献】：
期刊论文
[1]氯胺酮对未成年大鼠学习能力和细胞外信号调节激酶的影响[J]. 张建楠,张焰,任炳旭,王华.  临床麻醉学杂志. 2007(12)
[2]骨形态发生蛋白-2促进骨缺损修复的研究进展[J]. 岳鹏举,赵建宁.  医学研究生学报. 2007(12)
[3]IGF-1基因转染对骨髓基质细胞分泌IGF-1、ON和Ⅰ型胶原的影响[J]. 朱国强,吴织芬,王勤涛,李袁飞.  临床口腔医学杂志. 2007(10)
[4]转染人骨形成蛋白-7基因对骨髓基质细胞体外生物学活性的影响[J]. 李艳芬,闫福华,赵欣.  牙体牙髓牙周病学杂志. 2007(10)
[5]骨形态发生蛋白基因治疗骨缺损[J]. 翟波,刘丹平.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(41)
[6]湖北省人群牙周健康状况的抽样调查报告[J]. 江汉,杜民权,黄薇,郭颖,台保军.  口腔医学研究. 2007(03)
[7]应用牙龈角质细胞构建组织工程化牙龈的实验研究[J]. 赖红昌,戴烨扬,张志勇.  中国口腔颌面外科杂志. 2007(01)
[8]培养基对兔骨髓间充质干细胞扩增与分化的影响[J]. 须珏华,胡静波,周燕,谭文松.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(03)
[9]骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术治疗根分叉病变的研究[J]. 何建明,王慧明.  现代口腔医学杂志. 2007(01)
[10]GBR技术中屏障膜的应用和研究进展[J]. 余粤海,邓飞龙.  中国口腔种植学杂志. 2006(03)

博士论文
[1]hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物修复牙周组织缺损的实验研究[D]. 李艳芬.福建医科大学 2008

硕士论文
[1]自体骨膜细胞移植修复Beagle犬Ⅲ度根分叉病变的实验研究[D]. 伍晓红.福建医科大学 2008



本文编号：3266986