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骨保护素基因修饰联合细胞移植技术治疗牙周骨缺损的实验研究

发布时间:2021-07-28 21:11
  目的观察骨保护素(osteoprotegerin,OPG)基因修饰的自体骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)联合细胞移植技术治疗beagle犬牙周骨缺损模型的效果,为探索基因治疗牙周病提供依据。方法将真核分泌表达穿梭载体pSecTag2/B-OPG瞬时转染犬BMSCs,免疫细胞化学、Western-blot鉴定OPG蛋白表达水平,体外构建BMSCsOPG-PLGA和BMSC-PLGA的细胞支架复合物,扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。选用4只成年beagle犬,将其下颌两侧第2、3、4前磨牙作为实验牙,在每颗牙的颊侧构建牙槽骨缺损(4mm×4mm×3mm),并随机分为4组,即BMSCsOPG-PLGA(实验组)、BMSC-PLGA(阴性对照组)、PLGA(支架对照组)、空白对照组。术后6周处死动物,组织学观察,采用Image-Pro-Express系统测量新生牙槽骨、新生牙骨质高度、新生结缔组织的附着量。测量结果进行U检验。结果免疫细胞化学和Western-blot结果证实,转染细胞内有OPG蛋白的高表达。扫描电镜显示BMSCs可以在材料表面... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:52 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

骨保护素基因修饰联合细胞移植技术治疗牙周骨缺损的实验研究


手术过程

酶切鉴定,重组质粒,牙槽骨,切迹


图1.手术过程。(A:暴露牙槽骨,B:在每颗4~x4mmx3~(长度x宽度x深度)的牙槽骨牙槽骨缺损的根方表面做切迹,c:回植BMscE:瓣褥式复位缝合 Fig1.SurgiealProtoeol(A:ExPosedalveolarbone defeets(4nunx4mmx3nun)weresu嗯 ieallyereatedinthee却crimental妙 upsandtheeontrol脚 uPswere eollagenmembranesweretrimmedandadaPtedover surmundingalveolarbone, E:Thewoundswereelos

细胞生长,集落,细胞


图3.接种后第3天,首次换液后见细胞呈集落生长(图3,Al)传代后,细胞生长迅速,分散生长,折光性好(图3,AZ)(100X)Fig3.ThecellmorphologiesofBMSCs.ThePrimaryPassageofBMSCsfromthebonemarrowgrewasseParateelonesintheflash(Fig3.AI).AfterPassage,theeellswerewelldistributedandwereuniformityasthefibroPlastiemorphologywithlowerrefraetionatthesamemagnifieation(Fig3.AZ)(100x)

【参考文献】:
期刊论文
[1]牙周病实验动物模型的建立和应用[J]. 陈亚伟,王晖.  现代食品与药品杂志. 2006(01)
[2]FGF2基因转染对人牙周膜细胞生物学性状的影响[J]. 蒋宏伟,凌均棨.  中华老年口腔医学杂志. 2005(03)
[3]骨保护素基因修饰的pSecTag2/B载体的构建[J]. 曹寅,梅陵宣,吴迪,赵春晖.  上海口腔医学. 2005(03)
[4]细胞-支架构建方式的牙周组织工程实验研究[J]. 鲁红,吴织芬,田宇.  中华口腔医学杂志. 2004(03)



本文编号:3308652

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