miR-214抑制牙囊细胞成骨分化的体外研究

发布时间：2021-08-01 13:44

　　目的探讨miR-214对于牙囊细胞（dental follicle cells,DFCs）成骨分化的影响。方法双向差速传代法体外培养提纯牙囊细胞,以未转染的DFCs为对照（DFCs组）,通过向DFCs中转染miR-214-3p mimics（miR-214 mimics组）或miR-214-3p inhibitor（miR-214 inhibitor组）分别上调和下调DFCs中的miR-214的表达。成骨诱导7 d,qRT-PCR检测miR-214表达及相关成骨基因碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨粘连蛋白（osteonectin,OSN）、成骨相关转录因子2（runt-related transcription factor-2,RUNX-2）的mRNA表达,免疫蛋白印迹检测各组RUNX-2、β-catenin蛋白表达;成骨诱导14 d茜素红染色观察矿化结节形成的情况。结果骨诱导7d,相较DFCs组,miR-214 mimics组miR-214的表达上调,miR-214 mimics组成骨相关基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表达均低于DFCs... 

【文章来源】：口腔疾病防治. 2020,28(03)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

原代DFCs及经双向差速传代法提纯至第三代的DFCs

经q RT-PCR检测，转染1 d,miR-214 inhibitor组miR-214表达受抑制，较正常DFCs下降43倍（P<0.01),miR-214 mimics组表达上调41倍（P<0.01）；转染2 d及转染3 d,miR-214的转染效果逐渐弱化（P<0.05）（图2）。2.2.2 成骨诱导后miR-214的表达

miR-214 mimics组，成骨相关基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表达均低于正常DFCs组，但仅ALP在两组的差异具有统计学意义（P>0.05），而miR-214inhibitor组成骨相关基因OSN及RUNX-2、ALP的mRNA表达均高于DFCs组，且差异具有统计学意义（P<0.05）（图4）。图4 转染mi R-214 mimics及mi R-214 inhibitor并成骨诱导7 d ALP、OSN、RUNX-2 m RNA表达情况

【参考文献】：
期刊论文
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[2]双向差速法纯化大鼠牙囊细胞[J]. 王丽萍,李伯琦,铁晓敏,王琪,刘奕杉.  口腔疾病防治. 2016(03)
[3]中国25392名儿童与青少年错畸形患病率的调查[J]. 傅民魁,张丁,王邦康,邓燕,王佛汉,叶湘玉.  中华口腔医学杂志. 2002(05)



本文编号：3315632