MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究

发布时间：2021-08-02 13:13

　　口腔鳞状细胞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,严重危害人类健康。已有研究表明,口腔鳞癌患者免疫功能低下,且与病变的发展和预后密切相关,因此通过免疫治疗来提高患者生存率已成为目前的一个研究热点。目的：探讨MICA-NKG2D信号通路关键分子在口腔鳞癌发生发展过程中的表达及其临床意义。建立MICA稳定过表达的口腔鳞癌细胞系,通过体内外实验研究MICA过表达对NK及CTL细胞NKG2D的表达及细胞毒作用的影响,以期为利用MICA-NKG2D信号通路作为口腔鳞癌的免疫治疗靶标提供实验依据。方法：1.实时定量PCR和免疫组织化学技术检测口腔鳞癌组织标本mMICA mRNA及蛋白的表达,ELISA与流式细胞术检测口腔鳞癌患者血清中sMICA及外周血PBMC中NKG2D的表达,采用SPSS16.0软件统计,分析其与口腔鳞癌患者临床病理参数的关系。2.PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因全长的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1,构建最终表达载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细胞,G418筛选,荧光显微镜下观察绿色... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

正常口腔粘膜中NnCA的定位(sPx100);B.高倍镜强阳1免疫组织化学检测MICA的表达:Mi以定位于细胞膜与细胞质(sPx400):C、D、E、E癌旁组织呱以阴性、弱阳性、、强阳性表墩sPxZoo):o、H、I、J.高分化口腔鳞癌组织树以阴性、弱阳性、阳性、性下阳性表达(sPx20o)K、L、M.中分化口腔鳞癌组织呱eA弱阳性、阳性、强阳性表达(sPxZoo)

1.4讨论正常情况下皿CA组织分布局限，主要表达于胸腺和胃肠道上皮。本研究结发现，正常口腔粘膜珑CA呈阳性表达，主要定位于棘层，而角化层和基底层表达较少，考虑原因为口腔粘膜与胃肠粘膜同属消化道上皮，组织发生相同。最研究表明，MICA表达上调可能是细胞处于应激状态的标志，热休克、感染、症等均可使诵CA表达上调[l7一‘”l。口腔粘膜直接与食物、口腔内细菌相接触，咀嚼、搅拌食物可能伴发粘膜的微损伤，因而我们推测口腔粘膜MICA阳性表可能是细胞针对这些刺激所产生的一种免疫应答。MICA在癌旁组织中的表达位情况与正常粘膜类似，但表达强度有所增加。其可能的原因是，多数口腔癌者口腔环境不良，有咀嚼摈榔、抽烟、饮酒等不良嗜好，因而口腔癌患者的癌

1.4讨论正常情况下皿CA组织分布局限，主要表达于胸腺和胃肠道上皮。本研究结发现，正常口腔粘膜珑CA呈阳性表达，主要定位于棘层，而角化层和基底层表达较少，考虑原因为口腔粘膜与胃肠粘膜同属消化道上皮，组织发生相同。最研究表明，MICA表达上调可能是细胞处于应激状态的标志，热休克、感染、症等均可使诵CA表达上调[l7一‘”l。口腔粘膜直接与食物、口腔内细菌相接触，咀嚼、搅拌食物可能伴发粘膜的微损伤，因而我们推测口腔粘膜MICA阳性表可能是细胞针对这些刺激所产生的一种免疫应答。MICA在癌旁组织中的表达位情况与正常粘膜类似，但表达强度有所增加。其可能的原因是，多数口腔癌者口腔环境不良，有咀嚼摈榔、抽烟、饮酒等不良嗜好，因而口腔癌患者的癌

【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠舌鳞状细胞癌外周血淋巴细胞亚群的变化及其与肿瘤的关系[J]. 蒋灿华,叶冬霞,陈万涛,周晓健,张志愿,邱蔚六.  中华口腔医学杂志. 2005(06)
[2]舌鳞癌SD大鼠血清中Th1/Th2漂移与肿瘤进展的关系[J]. 蒋灿华,叶冬霞,陈万涛,周晓健,张志愿,邱蔚六.  中国口腔颌面外科杂志. 2005(03)
[3]卵巢肿瘤患者外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NK活性检测的临床意义[J]. 刘敏,孔北华,曲迅.  现代免疫学. 2005(03)
[4]膜型分泌型MICA对NK细胞受体NKG2D的相反调节效应及其对NK细胞受体谱的影响[J]. 张彩,冯进波,王郡甫,许晓群,张建,田志刚.  中华微生物学和免疫学杂志. 2004(02)
[5]NK细胞受体识别的多样性[J]. 田志刚,魏海明.  中国免疫学杂志. 2004(01)
[6]口腔鳞癌细胞系HLAI类分子异常表达及其机制探讨[J]. 唐秋莎,张建琼,祁兵,沈传来,鲁晓萱,鲍海逊,Soldano Ferrone,Xinhui Wang,谢维.  上海免疫学杂志. 2003(04)



本文编号：3317626