RECQ1沉默对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭及上皮间质转化的影响

发布时间：2021-08-03 15:44

　　目的:探讨沉默DNA解螺旋酶RECQ1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化（EMT）的影响。方法:体外培养人正常口腔角质上皮HOK细胞、口腔鳞癌Cal27细胞,采用实时定量RT-PCR与Western Blot检测RECQ1 mRNA及蛋白表达水平。采用RNA干扰法靶向沉默Cal27细胞RECQ1基因,实验分为5组:si-RECQ1组（si-RECQ1转染至Cal27细胞）、si-RECQ1+转化生长因子β1（TGF-β1）组（RECQ1沉默后加入TGF-β1）、si-NC组、TGF-β1组及空白对照组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,Transwell法检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用实时定量RT-PCR与Western Blot检测RECQ1及上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）、N钙黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）等EMT相关蛋白表达。结果:与HOK细胞相比,Cal27细胞RECQ1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）;与空白对照组、si-NC组相比,si-RECQ1组Cal27细胞中RECQ... 

【文章来源】：口腔生物医学. 2020,11(02)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

细胞划痕实验结果(×200)

Western Blot及实时定量RT-PCR结果显示:与人正常口腔角质上皮细胞HOK相比，口腔鳞癌细胞Cal27中RECQ1 m RNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05，图1)。2.2 RECQ1沉默效果

CCK-8法检测结果显示:随着培养时间的延长，si-RECQ1组Cal27细胞增殖抑制率逐渐升高，空白对照组、si-NC组、si-RECQ1+TGF-β1组Cal27细胞增殖抑制率在12 h后呈现平稳趋势，TGF-β1组12h后呈现下降的趋势。与空白对照组、si-NC组比较，si-RECQ1组各时间点Cal27细胞增殖抑制率均呈现升高趋势(P<0.05);与si-RECQ1+TGF-β1组比较，TGF-β1组各时间点Cal27细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05);其余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05，图3)。图3 RECQ1沉默对Cal27细胞增殖能力的影响

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3319886